原文由 xinjiayu 发表: 我所谓的:色谱是正常的指的是色谱的流量压力一只很稳定在一个固定的值上(150mp左右). 流动相脱气的方式是岛津自带的那个degaser,我还以为这样就行了呢.另外怎么用加热或高真空的方式脱气?我用的流动相是:己烷(hexane):乙醇(ethanol):二氧杂环乙烷(dioxane)=958:40:2的混合溶液.

1、你的流动相大约96%的成分是己烷，而其它成分也属于非极性溶剂，并没有很大改变溶液的极性，所以流动相在脱气之前溶解的氧气和氮气是较多的。

2、你的HPLC系统是带脱气装置的，是可以在溶液进入泵头之前脱掉相当一部分的。经常用的反相流动相就可以直接用它来脱气，因为水溶液中所含的气体量相对较少多了。
因而你的压力“一直很稳定在一个固定的值上(150mp左右)。”

3、你所用的己烷的黏度比异丙醇的小好多的，所以用己烷时反压小，而异丙醇大。
正己烷在25度时黏度值为：0.31cP；
异丙醇在25度时黏度值为：2.00cP。
而根据流体的阻力是与黏度成正比，流速的平方成正比的，仪器所测定的反压就是流体的阻力。
这就好理解了吧。
所以就有“己烷流动相,流速设定为1或者2,压力只有1-3mp”
而“用2丙醇做流动相,流量在1的时候,柱压就超过200kgf了”

4、在你用96%己烷做流动相时，出现压力大幅波动，是因为：含有少量气体的流动相在泵的往复运动中产生并随即消失：
在泵吸取溶液时，泵头有一个相对负压环境，气体被释放，出现在泵头处；
在泵泵出溶液时，泵头有一个相对正压环境，气体又被溶解，所以在后面是看不到气泡的；
在这个过程中，压力变化是会很大的，特别是在高压变的很高时，更明显。

5、加热脱气可以用超声处理的同时进行：
用超声波超声脱气时，延长脱气时间，流动相的温度会升高。
注意正己烷的沸点可不高，只有69度，如果不想进行蒸馏回流脱气，就要控制一下温度。
另外要在通风橱中操作。

6、Ve的含量测定，我是没做过，药典规定是用气相色谱法做的，不知道为什么。
个人建议：如要用液相色谱分析，就用反相色谱法，正相色谱太费事了，而且有机溶剂的毒性都不小。
你现在所遇到的问题，我都遇到过，很头疼的。