回复v3032387发表于：2018/12/18 16:01:40悬赏金额：
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做正相。方法流动相→ 无水乙醇：二乙胺=100：0.4（100ml无水乙醇要加0.4ml二乙胺）
用过大赛璐的柱子，用过赛分的柱子。
最初使用时异构体分离效果还挺好，使用几次后就不行了。无水乙醇冲洗，反着冲也是不行。
使用前无水乙醇小流速冲洗，使用后小流速冲洗。那台仪器也一直做正相。
我问色谱柱厂家，说二乙胺浓度有点高，如果反着冲后还是不行的话色谱柱就废了。
想问下各位老师，遇到过类似的情况吗？或者这个浓度是对色谱柱内基质影响大不。
感谢
原文由 馒头只是一坨面(v3032387) 发表:
我是咨询厂家后反冲的色谱柱-_-||
之前没注意过溶液的PH
条件是那样就用了 我试试看去
之前大赛璐的也咨询过厂家 ，主要是最初用过一根大赛璐的，也用了挺久，后来再买的大赛璐和赛分都没有第一根撑时候，可是溶剂没有变。就很奇怪。 |
那现在出问题了，我们就从源头查起咯：
1.首先把色谱柱的说明书拿出来细看一下，看看柱子使用的条件和范围；
2.测测你溶液的pH值，是否是一直处于你色谱柱耐受临界点使用，这样对你的色谱柱是有一定的伤害的；
3.找厂家要色谱柱清洗的方法，与自己平时清洗的方法进行对比，分析一下自己清洗色谱柱的方法是否合理与完全；
4.柱子也有可能有批间差异，我们实验室也遇到过，有些柱子就是比较耐用，有些就不行，这个就没办法了。
5.柱子千万别反冲，那是实在迫不得已无可挽救的时候才那么做。
你自己先排查排查，祝好！
Insm_220b9c52 回复于：2018/12/18 16:26:58
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