回复xiaorui1211发表于：2007/1/9 15:27:00悬赏金额：
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已解决
求教各位，我在做生物样品的超薄切片时，切面已经调整好，所有步骤均按标准进行，但切70纳米薄切片时，无法切出连续的切片，一直都是切两三刀空切后，突然切出来一片较厚的切片。根本无法挑出满意的薄切片。
在各个方面都做了改善，所用玻璃刀也是新制的，但仍然无效？
跪求解决办法？
影响超薄切片的因素很多，比如样品本身的软硬度，举例来说，切皮肤标本和切肝脏组织标本，切肝脏组织就非常容易，皮肤就非常难；包埋剂的软硬度，比如冬天和夏天配置的环氧树脂软硬度就有区别；切片刀的锋利程度，刀子钝就不好切片，哪怕是新制作的玻璃刀和使用钻石刀切片都有很大区别；还有刀台上切片刀的角度；切片时的速度等等等等都影响切片情况。
很多时候光凭说解决不了问题，必须自己亲自切才能找到原因到底在哪。祝你好运！
原文由 xiaorui1211 发表:
原文由 urumqi 发表:
这一段很忙,上论坛少了,呵呵
不知道你的生物样用什么原料包埋的?我用玻璃刀切工程师带来的做验收用的生物样没有太大问题,可惜我们主要切高分子材料,多少带点韧性的高分子材料切起来都会像你说的那样,切不薄,(说的是不带冷冻台的机器).但是用钻石刀会好一点,不过生物样需要更大的完整性,所以你会更难一点.
罗嗦这么多.我能想到可能的问题有(1)包埋树脂的问题,固化后不够硬(也许是包埋过程的问题?)(2)试试钻石刀(3)用冷冻超薄切片机(4)调整一下刀架的角度,以前我上传过的资料中有比较详细的介绍
总之,切片不容易,不带冷冻台的切片更难!这是一种要求有耐心有细心的工作.我们的超薄切片机已经安装差不多一年了,没切过几个样,因为没有冷冻台,我宁愿去做TEM也不愿意切样.
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非常感谢你的建议。我用的是Epon812包埋，浸透了一周左右，包埋块硬度也基本合适。所用的切片机没有冷冻台。刀架角度为4度。如果这些都没有问题的话就应该是刀的问题了。
我在考虑把包埋块送出去，请人帮忙做超薄切片。但不知道什么地方能够做，收费如何？ |
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北大生物系，北京燕山石化，浙江大学华家池校区，很多地方都有，看你的具体位置，就近联系吧
zhouzb 回复于：2007/1/17 11:57:00
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