回复junqingzhou11发表于:2006/12/7 10:00:00悬赏金额:
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我准备用高效液相色谱测酶水解蛋白的肽的分子量(小于1万道尔顿),应该用凝胶柱吧,不知哪种型号的好些呢?
洗脱液用什么呢?可以用蒸馏水么?
另外如果是液相的半制备,制备量大概是多少呢?
原文由 junqingzhou11 发表: 我准备买根凝胶柱测分子量低于一万道尔顿的小肽混合物,这根柱子一万多,所以现在考虑买哪种型号的。 查资料有TSK gel 2000 SWxl TSK gel 2000 PW系列的, 根据商家提供资料,测分子量5000以上,他们又说可以测5000以下的,我现在在慎重考虑,不知谁已做过这方面的试验,请交流一下经验。 谢谢!
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如果说要测分子量,可以用凝胶柱。
但如果要测小分子量,那两个(TSK 2000 SW/PW)都测不了5000以下的,至少测不准。
建议用质谱测定分子量,理由就不用说了吧。
一般来说肽段用的是乙腈,水,磷酸或磷酸盐类的缓冲溶剂这些东西的混合体系。很多情况下PH值可能到2左右。所以柱子的选择还要考虑这些因素。我用C18柱做过,不过分子量只是一两千左右,没有到八九千。这个分子量范围反相柱不知道容不容易堵,柱压怎么样。你再看看文献。