回复v3057165发表于:2020/5/1 9:05:22悬赏金额:
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未解决
我做大豆蛋白肽的超氧阴离子清除率,用的是邻苯三酚法,波长设置为325nm,可是最后用紫外光度计测时,前面2分钟吸光度是小于1,后面的吸光度就大于1了,算出来的结果是负数....
为什么会出现这种情况? 我有一次测的吸光度全是小于1的,这两次就测的有大于1的吸光度,请问是哪里出问题了?
(PS: 有5个样,光度计只放一个调零的皿和装样液的皿,我5分钟测完一个样,再换另一个样来测,一个一个的测,其它没测的一直放在37度水浴保温。)
(超氧阴离子自由基(O2-·)清除率测定
取50mmol/L的Tris-HCl缓冲溶液(pH8.2)4.5mL和4.2mL蒸馏水混合均匀,在37℃水浴保温20min后,立即加入37℃预热的3mmol/L邻苯三酚0.5mL,迅速摇匀后倒入比色皿,以10mmoL/L的HCl溶液作参照,在325nm波长处每隔30s测定吸光度,连续测定5min,计算线性范围内邻苯三酚自氧化速率。按上述步骤在加入邻苯三酚之前,分别加入0.1mL不同浓度的样品溶液,相应减少蒸馏水的量,同样以10mmol/L的HCl溶液作参照,在325nm波长处测定吸光度,以吸光度对时间作图表示邻苯三酚自氧化的抑制情况。)