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共有 0 人回复了该问答请问化学发光法的具体步骤方法。 (贤集网刊)
 回复v3046149发表于:2020/2/23 15:57:36悬赏金额:9积分 状态:未解决
简介:
PIERCE的化学发光技术居于世界领先地位。由于采用了持有专利的Luminol/增强剂技术,因此灵敏度高、发光持续时间长。正是由于性能卓越,许多知名的化学发光试剂盒厂商都是采用PIERCE提供的底物系统作为生产原料。目前,PIERCE的化学发光技术已经广泛用于Western/Northern/Southern印迹、ELISA、EMSA等实验中,使用范围越来越广。SuperSignal® Western化学发光底物系统是PIERCE的旗舰产品。

原理:
在HRP催化作用下,过氧化物与Luminol/增强剂反应发强光,可见光信号可以用压片法检测。Western实验中,HRP标记在二抗上,与一抗-靶蛋白复合物结合,再用SuperSignal®底物进行发光检测。具有方便、灵敏、信号持久的特点。

SuperSignal®系列化学发光底物的性能:

West Pico
化学发光底物 West Dura
持久性化学发光底物 West Femto
最高灵敏度化学发光底物
最低检测极限 10-12克 10-14克 10-15克
建议抗体稀释度 一抗:1/1000-1/5000 一抗:1/1000-1/50000 一抗:1/5000-1/100000
二抗:1/20000-1/100000 二抗:1/20000-1/250000 二抗:1/100000-1/500000
信号持续时间 6-8小时 24小时 8小时
工作溶液稳定性 室温24小时 室温24小时 室温8小时
贮藏液存放时间 室温1年 室温1年 室温6个月或4°C一年
推荐印迹膜 NC膜 NC或PVDF膜 NC或PVDF膜

特点/优点:
1.强发光;相同条件下,SuperSignal® West Pico底物产生的光强度是ECL底物的2倍(如图示:SuperSignal® West Pico与ECLTM系统的发光强度的比较)。

uperSignal? West Pico底物,曝光1m
ECLTM系统,曝光1m SuperSignal? West Pico底物,曝光5m
ECLTM系统,曝光1m

2.卓越的灵敏度,抗体稀释倍数高(如图示:SuperSignal® West Pico的检测灵敏度)

用1/5000 的一抗和1/400000的二抗标记IL-2的杂交膜,用SuperSignal® West Pico底物可以检测低至61飞克的IL-2

3.稳定的信号持续,信号持续时间长(如图示:SuperSignal® West Pico与ECLTM系统发光动力学比较)

二抗标记的膜用两种底物系统孵育6h后相对发光强度比较

具体资料可见:
http://www.ebiotrade.com/custom/hyclone/SuperSignal.htm
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