所谓反相色谱柱都有一个共同的特性——固定相的极性小于流动相的极性。 固定相对于非极性和弱极性的组分保留较强，流动相的极性越小，洗脱能力越强。
但也有其特殊性——对于反相键合相填料，键合的烃基链长增加，载样量增加，保留因子增加，对非极性物质的保留增加。在相同的硅胶基质上，相同的键合度，配基分子量越大，碳载量越大。相同的硅胶，相同的配基，覆盖率越大，碳载量越高。相同的表面覆盖率，碳载量随孔径的增加而减少。因此，不同填料不同厂家的色谱柱是不同的，要根据不同的色谱柱做相应的处理，不要一概而论。