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共有 16 人回复了该问答
毛细管等电聚焦
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wy20071722
发表于:2020/1/9 20:15:35
悬赏金额:
6积分
状态:
未解决
最近实验室有人做毛细管等电聚焦,有些问题不解。
毛细管等电聚焦中使用的毛细管填充两性电解质,两端插入不同的pH的磷酸和NaOH中,过程是否类似于等速电泳pH梯度形成的过程?在毛细管两端是否需要添加封堵剂?
毛细管等电聚焦的过程分为:进样、聚焦和分离三个步骤。不知道大家在进样的时候目标蛋白是如何进样的:是混在两性电解质中进样还是单独气压进样?聚焦过程中marker与样品分别移动到等电点的位置,这个聚焦的程度是如何把握的?还有最后观察到的结果——推出的过程是电压推出还是气压推出的,这个过程有什么不同?
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回复
1#
nini2006
回复于:2020-01-10 01:39:35
ITP是引入前导和尾随电解质并将样品夹在这两种电解质中间以达到富集的目的,这个分离模式没有pH梯度的。而在IEF中,封堵剂可加可不加,不加的话跟CZE很相似。
我见过的样品是与两性电解质混合后再进样的。为了保持整个体系液体的一致性,与电解质混合进样才合理……
好多问题,我答不完了,坐等别的大神来补充吧~
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