回复v2701739发表于：2014/10/24 19:03:04悬赏金额：
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我做的是高效液相色谱，大致的步骤是，称10g全脂乳粉，用50℃温水溶解定容至100mL容量瓶中，倒入50mL离心管中离心11000r/min 10min，再用漏斗过滤至50mL量筒中收集滤液，待免疫亲和柱过滤。用快速滤纸过滤就很慢很慢了，有时好不容易收集了滤液上免疫亲和柱也容易堵，想问一下大家怎么能提高过滤速度，是要多离心几次吗？还是要加乙酸铅沉淀蛋白呢？要是加的话要加多少浓度多少毫升呢？加乙酸铅会不会对黄曲霉毒素M1有影响呢？
可以参看免疫亲和柱里的使用说明书，说明书里针对不同样品会有相应的样品前处理过程，可以参看。国标GB/T 23212-2008中是用冷冻离心后过滤的。蛋白质沉淀剂没有尝试过，可以进行加标看回收率。
bingwang228 回复于：2014/10/25 9:14:21
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