4.3.6　维生素Ｃ测定--2.6－二氯酚靛酚钠盐滴定法
。。4.3.6.1　仪器：
　　a、砰钵、烧杯、锥形瓶、容量瓶、移液管、5毫升微量滴定管(最小分度值0.02毫升)。
　　b、减压抽滤装置一套。
　　c、托盘式扭力天平 (感量0.01克)。
。。4.3.6.2　试剂
　　a、2%草酸溶液，称取草酸 (AR)2克，用蒸馏水溶解并稀释至100毫升。
　　b、标准维生素C溶液，精密称取维生素C(AR)约50克,置于100毫升容量瓶中,用2%草酸溶液稀释至刻度，摇匀(临用前配制)
　　c、2.6-二氯酚靛酚钠溶液：称取2.6-二氯酚靛酚钠（ＡＲ）约50毫克，溶于50毫升热蒸馏水中，冷却后定量移入250毫升溶量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮存于棕色试剂瓶中，置冰箱中保存。
　　标定:精密吸取标准维生素C溶液2毫升，加2%草酸溶液5毫升.用2.6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至桃红色，在15秒钟不褪色为终点，根据已知标准维生素C溶液和2.6-二氯酚靛酚钠溶液用量，按下列公式计算 (1毫升2.6-二氯酚靛酚钠溶液相当于维生素C毫克数)
　　Ｎ＝（Ａ×2）/V
　　式中：Ｎ--1毫升2.6-二氯酚靛酚钠溶液相当于维生素Ｃ毫克数。
　　　　　Ａ--１毫升维生素Ｃ标准溶液所含维生素Ｃ毫升数。
　　　　　Ｖ--滴定２毫升维生素Ｃ标准溶液所消耗2.6-二氯酚靛酚钠溶液毫升数。
　　d、15%亚铁氰化钾溶液，称取亚铁氰化钾15克，用蒸馏水溶解并稀释至100毫升。
　　e、30姊醋酸锌溶液，称取醋酸锌30克，用蒸馏水溶解并稀释至100毫升。
。。4.3.6.3　操作步骤:
　　样品配制，精密称取蜂花粉样品约10克，置于轩钵中，加少许2%草酸溶液研细，定量移人100毫升容量瓶中，加2%草酸溶液稀释至刻度，将其全部转移到200毫升锥形瓶申，再加人15%亚铁氰化钾溶液数毫升，然后加30%醋酸锌溶液数毫升 (以使溶液不沉淀为止)过滤备用。
　　滴定:精密吸取样液10毫升，置千锥形瓶中，用2.6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至呈桃红色，在15秒钟不褪色为终点，记下2.6-二氯酚靛酚钠溶液的毫升数。用下列公式计算：
　　Ｗ＝{（Ｖ－Ｖ1）×Ｎ}/B×(b/a)×100
　　式中：Ｗ--100克蜂花粉团样品中含维生素C毫克数。
　　　　　Ｖ1一一滴定空白所消耗的2.6-二氯酚靛酚钠溶液的毫升数。
　　　　　Ｖ--滴定空白所消耗的2.6-二氯酚靛酚钠溶液的毫升数。
　　　　　Ｎ--１毫升2.6-二氯酚靛酚钠溶液相当的维生素Ｃ毫克数。
　　　　　Ｂ--滴定所取样品溶液的毫升数。
　　　　　a--样品的克数。
　　　　　b--样品的溶液总毫升数。
。。4.3.6.4　平行试验结果的允许误差为0.3毫克/100克。