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共有 2 人回复了该问答
关于western 实验
回复
v2925070
发表于:2020/8/15 11:11:42
悬赏金额:
2积分
状态:
未解决
我前几天做western 实验,膜是用ECL染色的,感觉样品刚拍的时候信号很强,但是第二天重新拍就会发现信号比原来猝灭的很快,是怎么回事啊?求高手指点。
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回复
1#
v2921337
回复于:2020-08-15 11:40:42
1、含HRP的抗体
抗体是很重要的一方面因素,对抗体方面来说,建议你适当降低抗体的浓度,看是否有改善;
2、做western实验时快速操作能缓解“淬灭”的问题,而且在样品拍摄期间一定要保证膜不能干,否则拍摄效果很差;
3、另外,对发光试剂ECL试剂来说,除过氧化物因接触空气被逐渐还原外,ECL的成分通常都不稳定,我们实验室原来用过自配的A液和B液,初用效果还行,用一段时间就明显感觉还是不如大牌子的效果好啊,建议你选用市售发光稳定的发光试剂来解决“淬灭”的问题,有些试剂贵点也有它贵的道理呀。
希望赛智可以帮助您。
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