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共有 7 人回复了该问答
有做单抗CE-SDS分析的大侠吗?几个问题求教
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v2681763
发表于:2020/7/21 9:27:39
悬赏金额:
4积分
状态:
未解决
先上beckman试剂盒说明书上的两张图
还原条件
非还原条件
几个疑问,大家一起来讨论下
1 非还原条件下并没有加入巯基乙醇,为什么还会出个和还原条件下差不多大小的巯基乙醇峰呢?
2 资料说明NG=非糖基化重链,那非还原条件下NG是否应该更准确的表达为非糖基化的完整抗体?
3 按理说NGHC(非糖重链)和 NG-IgG(非糖完整抗体)含量应该相当,但是为何所有实验 NG-IgG含量均>NGHC?
附件
IgG purity.pdf
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回复
1#
v2812644
回复于:2020-07-21 21:13:39
回复你的问题,如下:
1。根据我手头的资料,MT10.5min的位置并没有标注任何说明。见附件P31-P32。事实上这个位置也不是巯基乙醇。
2。非还原条件下的NG准确表达为非糖基化的抗体蛋白。(即完整抗体蛋白切除糖基后的产物,注意这里已经不是完整抗体蛋白了)
3。你是通过绝对峰面积比较的吧?这里NG-IgG的含量确实应当与NGHC相当,你需要采用校正峰面积(即峰面积/迁移时间)来比较。
附件
A51967(1).pdf
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