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共有 10 人回复了该问答液相色谱两针峰面积重现性差
 回复youlemei发表于:2013/8/1 15:12:47悬赏金额:50积分 状态:已解决
色谱柱是C18,25cm之前水/乙腈 70/30,柱压是10.2,前几天用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80,PH=8柱压6.7,之后用水/乙腈 70/30,柱压大概6.6,做一个样品重现性很好,几分钟之后做一个别的样品,稍微有点碱性,再做之前的样品,峰面积就不行了,差很多,不知道是什么原因造成的,我今天换了根柱子,也不平。
zhoujin83 回复于:2013/8/2 12:20:04
原文由 youlemei(youlemei) 发表:
色谱柱是C18,25cm之前水/乙腈 70/30,柱压是10.2,前几天用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80,PH=8柱压6.7,之后用水/乙腈 70/30,柱压大概6.6,做一个样品重现性很好,几分钟之后做一个别的样品,稍微有点碱性,再做之前的样品,峰面积就不行了,差很多,不知道是什么原因造成的,我今天换了根柱子,也不平。


你的仪器是什么型号的啊,会不会是泵的隔膜破了,因为你用了缓冲盐。还有,你说用水:乙腈=1:9的溶液冲洗,是写反了吧
doczheng 回复于:2013/8/2 8:45:09
这两个样品都是要求在同一个条件下吗?
如果不是,可能残存在柱内难以洗脱,
同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,
jncxyy2012 回复于:2013/8/2 6:51:07
用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80做流动相时,缓冲盐是否会有析出?
 回复  1# xky0230699  回复于:2013/8/1 21:28:08
水/乙腈 70/30前面是10.2,后面是6.6这个差得有点大,是不是没有平衡好,建议把系统和色谱柱清洗一下再检测,同时观察压力的变化
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