回复w1981s发表于:2006/7/7 22:33:00悬赏金额:
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已解决
出峰时间发生非常大的偏移,求助!
我用液相色谱作除草剂噻吩磺隆的残留时,出现了很大的问题,主要是出峰时间发生了变化。我先将情况说明一下,请各位达人帮忙。
从今年三月份以来,我进的标样是在7.1分钟左右出峰,进小麦植株样品也非常之好,但到了6月18日,我上午先进了标样,与以前的重复性很好,接着我就进了一批小麦植株样品,到了下午,我在进标样时,7.1分钟及其附近完全没有峰了,而在2.7分钟则出现了一个新的峰,比原来7.1分钟峰的灵敏度要高,以后进的所有标样均是如此,而且符合线性关系。但是进小麦植株样品时,在标样出峰(2.7分钟)的地方有一个非常高的峰,感觉就是许多峰在一块出掉了,我在空白植株中加标,仍然找不到标样峰。此外,以前进的小麦植株样品在标样出峰之后仍在很多杂峰,我要走个20分钟才能进下一针,现在6分钟以后基本上就是展平的了,没有峰出现了。
为了解决这个问题,重新配了标样,情况依旧,改变条件仍是如此。系统最初压力是有一点高,换了白芯,压力恢复正常。系统也有控温箱的。最主要的一点,其他人进别的农药样品仍跟以前一样。所以我现在头都大了,根本不知道原因在哪里。
我的色谱条件是t=30℃,甲醇:水=60:40,流速0.5ml/min,λ=254nm。仪器是Agilent 1100型,泵是四元泵。甲醇和水都是同一批次的。
不知我的表述清楚与否,跪求帮忙。
mhsr 回复于:2006/7/8 11:02:00确实挺麻烦的,我考虑是流动相的问题,全部换掉看看怎么样
流速=0.5ml/min?是不是被改成1ml/min了?流动相是以前的?水要新的,水里容易长细菌。
si 回复于:2006/7/14 16:09:00
核实一下甲醇、水、样品,以及盛装的各个容器是否有被污染。我曾经有一次做某物质的UV,严格按标准操作程序反复重做了好几遍,结果总是出现本该无色的溶液居然变成了淡绿色,所有人皆不得其解。后来好一段时间后才发现是装蒸馏水容器没洗干净被污染了。
用最笨的排除法,先换柱子,还不行的话,换台仪器,再不行,所有东西重新配制一遍。
急需配制PH=3.5的缓冲溶液,用于有0-2mmol草酸和五氯酚钠存在,约25度的体系中使该体系在草酸不断降低的情况下PH值稳定在3.5。
用下列配方配制了PH=3.6的缓冲溶液:
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml
用PH计测为3.9(仪器显示液体温度为29.5度),用氢氧化钠调至3.5,但加入100mmol草酸数滴,即变成3.4。似乎没有什么缓冲效果。
请教各位,怎样解决配置时的温度与使用时温度不一致的矛盾,缓冲液一般可存放多久,是否现配现用最好?缓冲液的用法用量有哪些讲究?
谢谢!