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共有 3 人回复了该问答0.01molph=7.4 的磷酸盐缓冲溶液的配制
 回复zzz23010402发表于:2020/5/13 10:47:59悬赏金额:12积分 状态:未解决
有谁知道0.01molph=7.4 的磷酸盐缓冲溶液的配制方法啊,急。最好是钠盐的,钾的也行。
 回复  1# xiaowang268  回复于:2020-05-13 13:09:59
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法  0.01M PBS    PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2) PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L  称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4℃冰箱中即可。  需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。 母液的配制:  0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水 各种浓度PB(pH=7.4)的配制:  先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。  然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:  0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。  若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。 另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :  pH      0.2M NaH2PO4(ml)        0.2M Na2HPO4(ml) 5.7            93.5                          6.5  5.8            92                            8            5.9            90                            10 6.0            87.7                          12.3 6.1            85                            15 6.2            81.5                          18.5 6.3            77.5                          22.5 6.4            73.5                          26.5 6.5            68.5                          31.5 6.6            62.5                          37.5 6.7            56.5                          43.5 6.8            51                            49 6.9              45                          55 7.0              38                          62 7.1              33                          67 7.2            28                            72 7.3              23                          77 7.4              19ml                        81ml  7.5              16                          84 7.6              13                          87 7.7            10.5                          90.5 7.8              8.5                          91.5 7.9            7                              93 8.0            5.3                          94.7    0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法  称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。  需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。  PH            7.6      7.4        7.2        7.0  H2O      1000    1000    1000    1000  NaCl        8.5      8.5        8.5        8.5  Na2HPO4 2.2      2.2      2.2        2.2  NaH2PO4 0.1      0.2      0.3        0.4  根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。    PBS缓冲液  称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。 PBST缓冲液  取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。  如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH在6.5左右,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。  十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~      PH8.0的PBS配方详细  1. NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L    2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。  3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L
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