回复v2704726发表于:2013/4/21 11:09:59悬赏金额:
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Buffer配制方法是 0.5M的硼酸 + 0.025M HP-β-CD + 0.8g/L PEO,用氢氧化铯调PH9.10 用于分离乳清。
电泳条件是压力进样0.5PSI,5S,工作电压14KV,电流约65uA,电泳时间30min。
但是单独跑Buffer测试的时候,经常出峰而且出峰时间不固定。电泳前10min电流较稳定,但20min之后,电流开始陡然下降并不稳定,会从65uA急剧下降到10多uA,然后电流波动剧烈。
毛细管是新换的,用别人的现成缓冲液跑他们的样品的时候,重现效果很好,毛细管活化应该没有问题。
我曾经遇到电流不稳的问题,最后排查出是buffer的原因,其实不是buffer本身,而是由于配制溶液的容器的问题,没洗干净
Buffer的配方一样,不过不同的人配制出来的,经常会有不同
"用别人的现成缓冲液跑他们的样品的时候,重现效果很好"。说明是你缓冲体系的问题。电流不稳定和出峰时间不一致更说明了这一点。buffer有峰很正常,很多时候光进水会有峰呢。
从你的缓冲溶液的添加剂里面找原因吧。很多时候,buffer要新鲜配制,久置会变质。