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共有 18 人回复了该问答瘦肉精检测
 回复ddt77930发表于:2006/6/21 12:11:00悬赏金额:20积分 状态:已解决
近年来,瘦肉精的非法滥用已得到有效控制,莱克多巴胺作为瘦肉精的替代品,滥用趋势明显上升。在莱克多巴胺的检测中,常常会遇到这样的现象:用ELISA检测阳性的样品,用色谱法确证时却都为阴性,而且检测结果大相径庭。不同ELISA试剂盒的检测结果也相差很大。为什么会出现这样的情况呢?以下抛砖引玉,欢迎大家讨论。

1.莱克多巴胺的快速代谢特性
莱克多巴胺在动物体内不能稳定存在,会快速代谢,国外资料表明,在停药三天后,动物体内的莱克多巴胺原药残留量将很低,而以代谢物的形式存在动物体内。莱克多巴胺的代谢物主要有三种:莱克多巴胺葡萄糖甘酸A、莱克多巴胺葡萄糖甘酸B、莱克多巴胺葡萄糖甘酸C,而三种代谢物的比例是不确定的。
举例说明,如果给一头猪喂添加莱克多巴胺的饲料,在停药第0天尿样中的莱克多巴胺残留浓度为20ppb,第3天后,莱克多巴胺残留浓度将<1ppb,而莱克多巴胺葡萄糖甘酸A + 莱克多巴胺葡萄糖甘酸B + 莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的浓度将>19ppb。

2.莱克多巴胺的正确检测方法
根据上述,要准确检测莱克多巴胺的残留量有两个选择:
A:除检测莱克多巴胺外,增加对莱克多巴胺代谢物的检测。
B:在检测前,用酶解的方法将莱克多巴胺代谢物还原成莱克多巴胺原药,再检测莱克多巴胺的含量。但酶解需要16小时。
对ELISA试剂盒,选择A和B都是可能的,但选择A依赖于ELISA试剂盒的交叉反应特性。
对于色谱方法,由于主要代谢物有三种之多,选择B更可行和方便。

3.ELISA试剂盒交叉反应特性对检测的影响
不同莱克多巴胺ELISA试剂盒的交叉反应特性差别很大,目前市场上的试剂盒主要有以下三类:

A:对三种莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率都很低,不能检测代谢物。如果使用这种试剂盒,必须先作酶解还原。

B:对某些莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率很低,而对某些莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率极高。例如:
药物 交叉反应率
莱克多巴胺 100%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸A 1%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸B 3%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸C 380%
显然,用这样的试剂盒直接检测,将可能出现假阴性(当样品中莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的含量比较低时),也可能导致极高的假阳性(当样品中莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的含量不低时)。所以,也必须先作酶解还原。

C:对三种莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率比较均衡,例如美国柏尔的试剂盒:
药物 交叉反应率
莱克多巴胺 100%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸A 52%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸B 48%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸C 187%
用这样的试剂盒直接检测,合理选择阳性限,是不会出现假阴性的,当然,由于对莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的反应率超过了100%,会出现一定的假阳性,可以通过检测者的经验,适当提高阳性限来将假阳性率降低到合理的程度。

4. 总结
最准确的莱克多巴胺检测是将样品酶解还原后再进行检测,但酶解过程需要16小时,不利于快速检测的要求。而采用美国柏尔这样交叉反应比较均匀的试剂盒,合理选择阳性限,就可以在筛选时省掉酶解的步骤,极大地加快检测进程,减少检测工作量和降低检测费用。




humanqing 回复于:2006/6/30 10:03:00
哦  我知道美国的那个牌子  是TCC  我们实验室就买这个的
不过是我们图他的总代理离我们南农近哈哈  好象叫南京农水吧  用起来还可以的
chenpy1980 回复于:2006/10/24 21:21:00
原文由 ah1100 发表:
饲料中的盐酸克伦特罗如何前处理,急!!

我们是用农业部的标准
xh_nf 回复于:2009/11/14 21:55:05
饲料中的瘦肉精和肉类中的瘦肉精,用农业部NYT 468-2006 动物组织中盐酸克伦特罗的测定气相色谱-质谱法.pdf检测,回收率不错。尿样的用这个农业部尿样检测方法。从食品伙伴网查方法下载即可。
cuiyanhu 回复于:2008/9/15 18:25:50
楼主分析的很好,可是你了解过那些公司的试剂盒,还有你对其产品进行过应的对比试验吗?如果做可以发出来给大家看看,再帮大家分析,这样可能更有说服力.您 说 呢 ?
 回复  1# ah1100  回复于:2006/6/22 11:19:00
饲料中的盐酸克伦特罗如何前处理,急!!
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