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共有 9 人回复了该问答Waters 1525/2707/2489 分析时的疑问和出现的故障
 回复zlzyc发表于:2020/8/24 21:03:05悬赏金额:19积分 状态:未解决
色谱系统是:Waters 1525/2707/2489

这是增补版中的测定条件,





因为一直有拖尾,不知道我的调节的方法对不对,基础知识不是很牢靠。[hr/]色谱柱:赛分,C18柱(具体是什么型号不记得了,人不在实验室)

测定出来的结果是:保留时间:15min,拖尾因子:1.9

①将梯度中的15改为10,即让流动相B 尽快进入色谱柱;拖尾因子:1.8,不行,继续下一步。

②将流速调到1.7mL/min,拖尾因子:1.5,有改观,但还是不理想。色谱柱的说明书上表明流速仅限制于压力

③将柱温调节到45℃,拖尾因子:1.4,接着调节。

④流速调节到1.9mL/min,拖尾因子:1.4,未有改变。仍然是不达标。

迷茫了,(问题 1)难道要改流动相中乙腈的比例吗?应该如何调节呢?

(问题 2)像这样的梯度洗脱拖尾因子也是要求在0.95至1.05吗?有没有宽松一些呢?

[hr/]

直到快下班了还是一直没有结果,所以决定冲柱,将流动相更换成 ACN:水(0.2 : 0.9),如此冲了大概一个小时,此时系统都正常。接着设置在10分钟内将流动相过渡到100% ACN(A泵),离开了一会,回来之后发现系统压力显示24(psi),泵有震动,并有发出异响,好像是盐析出了,柱塞杆在摩擦的声音。立刻反应是①排气阀没关,检查了不是这个原因,并且重新关了再开,压力依旧。然后检查②流动相也还很充足。③将泵流速调至B泵1.0mL/min,压力还是这样。④将流速调至1.9,泵异常的声音没有了。但是重新调下来的时候压力还是24psi。

(问题 3)这是怎么了?应该如何解决呢?

[hr/]

还有W2707自动进样器的,目测针有些歪了。

进样时候不平行,就是偶尔会出现比正常的峰面积小一些的峰,经测试,没有规律的出现,时常要重做,重做有些时候又会正常。

(问题 4)不知道这个进样器是怎么了。

[hr/]

(问题 5)为了减少检测器灯的使用时长,怎么设置默认在开检测器电源的时候不点灯呢?
[hr/]问题有点多,希望各位老师、同仁不吝赐教,感激不尽!
 回复  1# shixiangqun  回复于:2020-08-25 21:50:05
原文由 zlzyc(zlzyc) 发表:
色谱系统是:Waters 1525/2707/2489

这是增补版中的测定条件,
色谱柱:赛分,C18柱(具体是什么型号不记得了,人不在实验室)

测定出来的结果是:保留时间:15min,拖尾因子:1.9

①将梯度中的15改为10,即让流动相B 尽快进入色谱柱;拖尾因子:1.8,不行,继续下一步。

②将流速调到1.7mL/min,拖尾因子:1.5,有改观,但还是不理想。色谱柱的说明书上表明流速仅限制于压力

③将柱温调节到45℃,拖尾因子:1.4,接着调节。

④流速调节到1.9mL/min,拖尾因子:1.4,未有改变。仍然是不达标。

迷茫了,(问题 1)难道要改流动相中乙腈的比例吗?应该如何调节呢?

(问题 2)像这样的梯度洗脱拖尾因子也是要求在0.95至1.05吗?有没有宽松一些呢?




问题有点多,希望各位老师、同仁不吝赐教,感激不尽!


ZYC:

一、拖尾现象指的是主成分还是杂质成分?

二、如果是主成分,查看报告中的塔板数,如果较低,说明这根柱子柱效太低,尝试换柱子重新分析。如果塔板数较理想,可能是其它方面原因。

三、配制流动相特别是要调PH值,尽可能用PH计调节,以确保PH值达到要求。

四、柱前有没有在线过滤器,如果有要检查滤芯有没有脏,如果脏更换新的。

五、以上是在原方法不变的情况下,找仪器本身原因,方法虽不可置疑,但每个实验室还是要做方法适用性实验。盐酸雷尼替丁可能有离子化趋向,所以方法中使用缓冲盐及PH要求,所以方法调整过程流速和柱温不是主要方向,流动相是主要方向。


六、梯度洗脱可能尝试去改,你没说出各个出峰顺序和保留时间,从方法上看,梯度可分为四个部分,分别斜坡上升、平行、斜坡下降、平行,前两步应该是分析的关键,是否所有的峰都是在两个阶段出峰,后两个阶段应该是让流动相回复到初始状态,以便下一针分析。

七、其它问题暂时没有时间帮你分析,你也可写详细的发我邮箱。
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