色谱系统是:Waters 1525/2707/2489 这是增补版中的测定条件,
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因为一直有拖尾,不知道我的调节的方法对不对,基础知识不是很牢靠。[hr/]色谱柱:赛分,C18柱(具体是什么型号不记得了,人不在实验室)
测定出来的结果是:保留时间:15min,拖尾因子:1.9
①将梯度中的15改为10,即让流动相B 尽快进入色谱柱;拖尾因子:1.8,不行,继续下一步。
②将流速调到1.7mL/min,拖尾因子:1.5,有改观,但还是不理想。
色谱柱的说明书上表明流速仅限制于压力③将柱温调节到45℃,拖尾因子:1.4,接着调节。
④流速调节到1.9mL/min,拖尾因子:1.4,未有改变。仍然是不达标。
迷茫了,
(问题 1)难道要改流动相中乙腈的比例吗?应该如何调节呢?(问题 2)像这样的梯度洗脱拖尾因子也是要求在0.95至1.05吗?有没有宽松一些呢?[hr/]
直到快下班了还是一直没有结果,所以决定冲柱,将流动相更换成 ACN:水(0.2 : 0.9),如此冲了大概一个小时,此时系统都正常。接着设置在10分钟内将流动相过渡到100% ACN(A泵),离开了一会,回来之后发现系统压力显示24(psi),泵有震动,并有发出异响,好像是盐析出了,柱塞杆在摩擦的声音。立刻反应是①排气阀没关,检查了不是这个原因,并且重新关了再开,压力依旧。然后检查②流动相也还很充足。③将泵流速调至B泵1.0mL/min,压力还是这样。④将流速调至1.9,泵异常的声音没有了。但是重新调下来的时候压力还是24psi。
(问题 3)这是怎么了?应该如何解决呢?[hr/]
还有W2707自动进样器的,目测针有些歪了。
进样时候不平行,就是偶尔会出现比正常的峰面积小一些的峰,经测试,没有规律的出现,时常要重做,重做有些时候又会正常。
(问题 4)不知道这个进样器是怎么了。[hr/]
(问题 5)为了减少检测器灯的使用时长,怎么设置默认在开检测器电源的时候不点灯呢?[hr/]问题有点多,希望各位老师、同仁不吝赐教,感激不尽!