回复huxuefang12345发表于:2006/5/15 10:07:00悬赏金额:
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本学生即将工作,重点在于操作液相气相,我想知道拿到一药品,该怎么样去摸索液相的流动相,因缺少经验,还望各位朋友帮帮忙.谢谢!
简单的方式就是依据样品、流动相、色谱柱的不同极性。进行选择。比如一个极性不大的含苯环的生物碱,在用C18柱子时,可以用乙腈、甲醇、水等进行配比摸索流动相,有时需要加点三乙胺。
原则之一,能用有机溶剂或水做流动相时就不要选择缓冲溶液。
之二,能等度洗脱就不要梯度洗脱。
根据样品的极性,性质先选择合适的柱子,是反相柱,还是正相柱。一般极性很小的,或者怕水或醇类选正相柱。反之可选反相柱,反相要比正相的应用的广些。而却流动相便宜。
1)根据样品的性质,是酸还是碱(广义的概念)。应选酸性柱,还是碱性柱。
2)根据样品的极性,先从高有机相含量开始试,逐步减少流动相,直到满足你的的分离要求。或者先走一个梯度,根据梯度洗脱的效果来定流动相的比例。个人建议对此化合物极性摸不准时,用梯度摸索效果比较好。
3)如果经常要摸索方法的,检测器最好配DAD检测器。可以进行全波段扫描以及进行峰的纯度检测。
原文由 tanggangfeng 发表: 根据样品的极性,性质先选择合适的柱子,是反相柱,还是正相柱。一般极性很小的,或者怕水或醇类选正相柱。反之可选反相柱,反相要比正相的应用的广些。而却流动相便宜。 1)根据样品的性质,是酸还是碱(广义的概念)。应选酸性柱,还是碱性柱。
2)根据样品的极性,先从高有机相含量开始试,逐步减少流动相,直到满足你的的分离要求。或者先走一个梯度,根据梯度洗脱的效果来定流动相的比例。个人建议对此化合物极性摸不准时,用梯度摸索效果比较好。 3)如果经常要摸索方法的,检测器最好配DAD检测器。可以进行全波段扫描以及进行峰的纯度检测。 |
恩不错
tting 回复于:2006/5/17 13:33:00
我的习惯是先用纯甲醇或乙腈试试,看看峰形和个数,然后用有水的混合流动相进一步分离调整
做药物先查药典,上面有大部分的药物的色谱条件,按照所示选择类似的色谱柱和流动相,再略微优化一下就可以了。