新柱高浓度样品时峰分裂_液相色谱_色谱_仪器问答_仪器信息网

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回复ianzeng177发表于：2020/9/11 17:09:29悬赏金额：7积分状态：未解决

新买的waters XBridge^TM Shield RP18（规格：4.6mm×250mm，5μm）色谱柱，柱温30℃；以0.02mol/L磷酸氢二钾溶液-甲醇-乙腈（30:20:50）为流动相；流速为1.0ml/min，检测波长为210nm。进样50微升。
样品1：浓度4mg/ml

样品2：样品1取1ml至100ml量瓶中，乙腈水稀释至刻度。即浓度0.04mg/ml

样品3：对照品0.8mg/ml

开始怀疑是不是样品的问题，就用了一根旧的相同型号规格的色谱柱，进了样品1，结果并没有分裂：

新柱中高浓度的3个峰的面积和正好约等于旧柱的一个峰，也进了空白，并不是干扰的问题。

现在只有怀疑这根新的柱子可能有问题，但是为什么低浓度的时候峰形很正常，高浓度就变成3个峰了呢？
求助各位高手，这是什么原因啊？希望大家能集思广益，多谢！好几千大洋的新柱子啊~~

1# michaelye2012 回复于：2020-09-11 19:16:29

1、waters XBridgeTM Shield RP18 碳链载量没有一般的C18的高，明显此柱容易过载，对比0.8mg/ml和4mg/ml的图可知；
2、此柱的优势是耐高水相，对极性物质的保留会增强，因此与其他的C18相比，出峰顺序会可能有部分颠倒，对比最后两张图，你的杂质的出峰时间明显后推；
3、C18有含碳量低中高三种类型，这三种柱子的保留行为差异较大，要针对你的分析物的性质来选柱子，不光要看品牌，还要看的系列，不同系列的优劣各异。

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