回复zsyj01发表于:2020/8/23 16:24:13悬赏金额:
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未解决
我刚开始上手液质,没经验,请大家帮忙分析一下实验中遇到的问题。
我用的是c18, RP, 100mm, 2.1um 的柱子,样品是steroids, 貌似很粘柱子。
gradient用的是: 100H20+0.1%formic acid 99.9%MtOH+0.1% formic acid
0 min: 60% 40%
5 min: 0% 100%
10min: 0% 100%
15min: 60% 40%
然后样品都是在6分多钟才洗出来,强度都还是挺稳定的。 但是,在接着样品之后,我把样品换成100%甲醇,然后一样的gradient, 跑了5次,居然每次都在6,7 分钟有峰出来,而且强度还很大,有的比我50ng/ml 的样品还高。
换了进样针,还是一样的问题。我就一直用100%甲醇跑,想把柱子上可能残留的样品都洗完。我样品换成100%的甲醇,然后一直保持流动相为100%甲醇不变30分钟,但是奇怪的是,这样跑了好几次,每次都是一开始一两分钟内有个峰,强度在10的3次方左右,跟我的样品差不多了,然后后面就没峰了。但是如果洗干净了的话,为什么每次接下来还是一样有峰呢?
大家会液质的同学,帮我看看吧,多谢多谢了!!