回复wmmsx发表于：2012/8/21 22:10:56悬赏金额：
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刚开始接触蛋白分析，样品等电点在5.0左右，使用C4，300A的反相柱，使用0.1%TFA和乙腈作为流动相，出峰正常，但换用20mM磷酸盐缓冲液(pH=6.5和4.5)和乙腈洗脱就没有峰，调高了乙腈比例仍然没有峰，请有经验的朋友指点，谢谢。
如果0.1%TFA分不开，那20mM磷酸盐缓冲液就更分不开，前者有一定的离子对作用，有助于分离，可以把有机相的比例降点，梯度洗脱，网上有什么相关文献可以参考。也要弄清楚你样品的成分，不然在乙腈存在条件下，可以蛋白会析出。
xky0230699 回复于：2012/8/23 14:57:31
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