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共有 11 人回复了该问答关于饲料氨基酸分析样品前处理方法的困惑
 回复vetgaowei发表于:2020/8/12 12:49:38悬赏金额:2积分 状态:未解决
按GB/T 18246-2000叙述:
7.1.1.1 常规水解法:称取含蛋白7.5-25mg的试样于20mL安培中,加10.00ml酸解剂,置液氮或干冰中冷冻,然后,抽真空至7Pa后封口。将水解管放在110度恒温干燥箱中,水解22-24h。冷却,混匀,开管,过滤,用移液管吸取适量的滤液,置旋转蒸发器或浓缩器中,60C抽真空,蒸发至干,必要时,加少许水,重复蒸干1-2次。加入3-5ml Ph2.2稀释上机用柠檬酸钠缓冲液,使样液中氨基酸浓度达50-250nmol/ml,摇匀,过滤或离心,取上清液上机测定。
困惑1:文中的安培与水解管是指同一个东西?对吧,一般的医疗器械公司或仪器设备公司是否可以买到?规格为20mL吗?
困惑2:冷冻一定要用液氮或干冰吗?我放冰柜里冷冻不行?对温度有什么要求吗?既然是国标,就应该讲清楚。
困惑3:抽真空是必需的吗?如果没此条件,我充氮气不行吗?无非是要求把氧气赶走,避免氧化反应
困惑4:过滤步骤,却没有说用什么方法过滤?一般的滤纸过滤可以吗?水解液中的氨基酸损失了怎么办?离心可能比过滤好点?
困惑5:我的实验室不具备这些前处理设备,有没有较为简单可行的前处理办法?但前提是不降低测定的准确性和精确性
困惑6:微波水解处理效果如何?哪种牌子和型号?大概价格?
期待大侠给以解答,不甚感激!
 回复  1# wangboxzzjs  回复于:2020-08-13 11:43:38
1:文中的安培与水解管指的是同一个东西。这个可选用耐压的螺纹玻璃管,也可定做硬质玻璃管,采用酒精喷灯封管。
2:如果没有液氮或干冰,可采用市售食盐+冰按1:3的比例混合。
3:如果不抽真空,有可能会导致爆管。因为在水解过程中,高温下可能会发生一些化学反应,产生气体,使密闭的水解管承受不了较大的压力而爆裂。
4:按照正确的方法,用滤纸过滤即可。
5:所用到的前处理设备都是实验室常用的,部分试剂即使没有也应该很快就可采购到。
6:这个前处理只是水解,微波的温度较高,很难控制,可能会对水解过程产生影响,所以不建议用微波方法。
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