所有提问
色谱 | 光谱 | 质谱 | 波谱 | 显微镜 | 物性测试 | 样品前处理 | 常用设备 | 食品检测 | 药物分析 | 环境监测 | 实验室建设/管理 | 认证认可 | 基础知识    更多>>
未解决的问题:146751
所有仪器问答:170711
 您现在的位置:首页 > 仪器问答 > 光谱 > 分光光度计分光光度计论坛
共有 5 人回复了该问答标准曲线的吸光度和浓度要求
 回复summer11发表于:2020/7/9 10:18:45悬赏金额:19积分 状态:未解决
刚接触UV,请教一个基础问题:

我做的标准曲线浓度是0.08ug/mL ~ 1ug/mL,吸光度是0.03~0.35,线性0.9995

样品的吸光度是基本都是0.00xx数量级,浓度就0.03ug/mL以下了(重测几次,RSD约3.2%,100%加标的回收率在90%左右)

所以我现在的问题是:

1)标准曲线的吸光度正常吗?不是说最好要0.2~0.8吗?

2)样品的吸光度太数据可信吗?是不是要增大浓度使其在标准曲线的中间段?

3)我所有的操作都是按照国标方法进行的,如果标样和样品的吸光度数据都偏小,那可能的原因是什么呢?

新手入门,请达人们多多指教~

非常感谢~~
 回复  1# lh2000d  回复于:2020-07-09 10:30:45
原文由 summer11(summer11) 发表:
刚接触UV,请教一个基础问题:

我做的标准曲线浓度是0.08ug/mL ~ 1ug/mL,吸光度是0.03~0.35,线性0.9995

样品的吸光度是基本都是0.00xx数量级,浓度就0.03ug/mL以下了(重测几次,RSD约3.2%,100%加标的回收率在90%左右)

所以我现在的问题是:

1)标准曲线的吸光度正常吗?不是说最好要0.2~0.8吗?

2)样品的吸光度太数据可信吗?是不是要增大浓度使其在标准曲线的中间段?

3)我所有的操作都是按照国标方法进行的,如果标样和样品的吸光度数据都偏小,那可能的原因是什么呢?

新手入门,请达人们多多指教~

非常感谢~~


从你给的上面的数据看你做的这条标准曲线不适用于测试你的样品。如果想准确定量的话你的样品浓度必须在你建立标准曲线所用的标样浓度范围以内。
如果标准是控制关心的样品的含量,像你这个情况结果就可以标为:<0.08ug/mL
如果要准确确定样品的含量是多少,可以重新建立一条浓度更低的标准曲线,将0.03ug/mL包含在内比如标样最小浓度的可以配一个0.015ug/mL 或0.02ug/mL
扫一扫查看全部5条回复
高级回复快速回复【花三五分钟,帮别人解决一个问题,快乐自己一天!】