回复wujohnson发表于:2006/4/29 17:10:00悬赏金额:
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我的液相没有梯度洗脱,请教高手合适的流动相配比!!
我用甲醇:乙酸胺=5:95 连峰也没有啊!先谢谢啊
没做过合成的,做过叶黄素、胡萝卜素。用乙腈:甲醇=80:10。流速1.0。柱子为Waters Xterra RP18。
甲醇:0.2M乙酸铵(用乙酸调PH=4.0)20:80 254nm 1.0ml/min C18柱
试试
柠檬黄的主吸收波长是420,但柠檬黄、日落黄,苋菜红等色素在254也有吸收,亮蓝的主吸收波长是620,所以做色素时要选择双波长:254和620。可以用梯度洗脱:甲醇 1、20-35% 3%/min 5 min 2、35-98% 9%/min 7min 3、98% 持续6min。
原文由 amoeba1982 发表: 合成色素一般要采用梯度分析的,等度分析对柠檬黄、苋菜红还可以,亮兰、日落黄就不适用了! |
是的,我们在做合成色素的时候也是这样,但好像是用230和620
很久以前做过,这次搬家不知道放哪了,大概记得配比有3种:20:80; 30:70; 40:60(这是亮蓝的),我上次做的时候用的是30:70,结果其他可以,亮蓝不出峰。是考核