最近再做一个总多酚的含测，是显色反映，大概方法是这样的。
待测液+福林酚试剂（显色剂）+碳酸钠溶液（缓冲，提供碱性环境），蒸馏水定容，反映一段时间。765nm下测定吸光度。
由于要做条件的优化，所以显色剂和缓冲试剂的加入量成为考察因素。例如考察福林酚的加入量，设计5个水平（1.0ml，2.0ml。。。。5.0ml），其他的因素不变，测定吸光度那个最大。
问题来了 那我是不是要每个水平都做一个试剂空白，还是单单用蒸馏水来做空白。
前提是试剂空白在所测的波长下是没有吸收的。
还有一个问题，重现性比较差，就算用标准品，几次测定的结果还是浮动很大（0.59-0.62）。用的是安捷伦的8453，02年的仪器了，别人都说重现性很好，我现在都在怀疑是不是灯的寿命到了。另外这个仪器不用走基线的，单光束。