回复mimi06发表于:2012/4/19 10:39:10悬赏金额:
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已解决
一根新的色谱柱柱效急剧下降,第一天4万多,到第六天2万多,第十天只有5千多。流动相:磷酸盐:乙腈=96:4,pH约4.5.请高手指点是哪的问题?以前也做相同的样品但是没有问题,试剂也没有问题,现在二十天用了两根色谱住了。
一则缓冲盐比例较大,再则可能是连续做样没有对色谱柱进行较好维护,维护不当就会造成这样的结果。若长期使用这个流动相比例,建议两根色谱柱换着做,用完毕及时冲洗色谱柱,以提高性能,问题不大!
只要看你的柱子,
1、水相比例过高
2、缓冲液没冲洗干净
3、流速有没有改变
4、柱压是否正常,预柱是否该更换
水相的比例太高了,建议加大乙腈的比例到6%,柱效不好的柱子用同比例不含盐的流动相冲干净以后,用纯乙腈走几个小时,柱效应该是可以恢复的
xizhi 回复于:2012/4/19 11:51:01
你那个流动相比例中磷酸盐貌似太高了,磷酸盐对柱子很伤的