(参考:日本厚生劳动省--食品中残留农药兽药饲料添加剂检测方法)矮壮素检测方法
1.分析目标化合物
矮壮素
2.仪器设备
带碱热离子检测器或高灵敏度氮磷检测器的
气相色谱仪及苯硫酚钠合成装置
下图为苯硫酚钠合成装置概况图:(略)
A:甲苯注入口
B:凝汽阀
C:炉台式加热器
D:双口圆底烧瓶
E:冷凝管
3.试剂
除下列试剂外,使用附录2所列试剂。
柱色谱法氧化铝(碱性):将柱色谱法氧化铝(碱性,粒径63~200μm)在650℃加热6小时后,放在干燥器中冷
却。含水量必须在0.1%以下。
甲醇乙基酮: 在1,000mL甲醇乙基酮中加入10g合成沸石,轻轻振摇后,放置12小时以上。
4.标准品
矮壮素:含矮壮素99%以上,分解点为245℃。
5.试验溶液的制备
a 提取方法
谷类:将样品粉碎过420μm标准网筛后,称取其20.0g。
水果和蔬菜: 准确称取约1kg样品,必要时定量加入适量水,搅碎混合均匀后,称取相当于20.0g样品的量。
加入100mL水:甲醇(1:4)混合溶液,用振荡器激烈振荡30分钟后,静置,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨
口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物,加入50mL甲醇,用振荡器激烈振荡30分钟后,静置,按上述同样操作,
合并滤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约30mL。
在浓缩物中加入25mL甲醇,20mL水和2g硅藻土,缓缓振摇混合后,静置,过滤。再用75mL水:甲醇(2:1)混合
溶液洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶,加入2g硅藻土,按上述同样操作,再用30mL水洗涤滤纸上的残留物,合并洗
涤液。
b 净化方法
在内径15mm,长300mm色谱管中,注入12mL悬浮在水中的强酸性阳离子交换树脂(粒径74~149μm),放出水至
柱上端留有少量的水。柱中注入25mL 8mol/L 盐酸,再注入水至流出液的pH6~7,舍弃流出液。接着,注入
50mL水:甲醇(1:1)混合溶液,舍弃流出液。柱中注入a 提取方法所得的溶液后,注入50mL水:甲醇(1:1)
混合溶液,再注入35mL 8mol/L盐酸,收集流出液于磨口减压浓缩器中,在50℃以下除去盐酸。残留物中加入
10mL乙酸乙酯:甲醇(6:4)混合溶液溶解。
在内径15mm,长300mm色谱管中注入10g悬浮在乙酸乙酯:甲醇(6:4)混合溶液中的柱色谱法用氧化铝(碱性)
,其上面再装入约5g无水硫酸钠,放出乙酸乙酯:甲醇(6:4)混合溶液至柱上端留有少量的乙酸乙酯:甲醇(
6:4)混合溶液。柱中注入上述溶液后,注入160mL乙酸乙酯:甲醇(6:4)混合溶液,舍弃最初的40mL流出液
,收集其后120mL流出液于磨口减压浓缩器中,在40℃下除去乙酸乙酯和甲醇。
c 苯硫基化合物合成反应
上述残留物中加入2mL 0.6%悬浮在干燥的甲基乙基酮中的苯硫酚钠溶液,用氮气置换上述减压浓缩器的茄型瓶
中的空气。塞紧后,在80℃加热30分钟,并不断振荡、混合,移入50mL分液漏斗中(Ⅰ),用4mL甲基乙基酮洗涤
上述减压浓缩器的茄型瓶后,再用8mLn-戊烷按上述同样操作,合并两次洗涤液于分液漏斗(Ⅰ)中,加入4mL
0.5mol/L柠檬酸溶液,用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,水层移入50mL分液漏斗(Ⅱ)中,有机溶剂层中加入
4mL 0.5mol/L柠檬酸溶液,按上述同样操作,合并水层于分液漏斗(Ⅱ)中。
在分液漏斗(Ⅱ)中,加入7mL4mol/L柠檬酸三钾溶液:4mol/L氢氧化钠(1:1)混合溶液和8mL乙酸乙酯:正己
烷(1:1)混合溶液,用振荡器激烈振荡15秒后,静置,分层后直接舍弃水层。
用放有少量无水硫酸钠的滤纸将有机溶剂层过滤,用少量乙酸乙酯:正己烷(1:1)混合溶液洗涤滤纸上的残留
物,合并滤液,加入乙酸乙酯:正己烷(1:1)混合溶液,准确至10mL,此为试验溶液。
6.操作方法
a 定性试验
按下列操作条件进行试验,试验结果必须与标准品按照5.试验溶液的制备c 苯硫基化合物合成反应相同操作所得
的结果一致。
操作条件
柱填充剂:柱担体中应含有5%
气相色谱法用硅酮。
柱:内径2~3mm,长1.0~1.5m的玻璃管
柱温: 150℃~170℃
进样器温度:220℃~250℃
检测器温度:250℃~270℃
气体流量:以氮气作载气。调节流速使N,N-二甲基-2-(苯硫基)乙胺约3分钟流出,调节空气和氢气的流量至
适当条件。
b 定量试验
根据与a 定性试验相同操作条件所得的试验结果,峰高法或峰面积法定量。
7.定量限
0.1 mg/kg
8.注意事项
无
9.参考文献
无
10.类型
A