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共有 27 人回复了该问答求助:关于人体血清中蛋白质的去除方法???
 回复jervis36发表于:2006/3/31 21:52:00悬赏金额:20积分 状态:已解决
我是个液相的新手,接触不到半年,以前是学习临床的,因为工作的原因,所以现在改作液相,这两天在作血清的时候遇到了好大的麻烦,就是需要测定的成分(水溶性的)的保留时间点上始终有个特别大的蛋白质,改了好多次的流动相及血清都经过几个预处理,那些个讨厌的家伙始终如一的在那儿(保留时间随着流动相改变而变,始终在我需要测定的成分周围出现,而且峰面积特别的大,还有其他的地方也有好多的蛋白质峰,每次进样前我都用0.2微米的一次性过滤器过滤后再进的样,流动相是甲醇/甲醇(10%):乙酸(0.5%)水溶液(89.5%)=0-25/100-75(梯度在30min变化,梯度曲线为6,柱子为迪马公司的C18 150*4.6钻石柱子)监测器为waters 2996 进样器为waters 2995    我的邮箱是jervis36@163.com或者电话028--89192580,QQ250116810谢谢各位高手了啊!!! 
   
easyboy 回复于:2006/4/3 12:34:00
原文由 who1235 发表:
比较彻底的是使用超高速离心机,直接祛除蛋白质。


同意这种说法,离心也是去除蛋白质的一种好方法。
guanzm1997 回复于:2006/4/4 9:39:00
第一,你说的杂质峰可能是色谱条件的问题,如果不走梯度的话试试。还有干扰的话,你就试试SPE柱。如果还有干扰,就不是蛋白的原因,你就采取反提的办法。这个干扰峰有可能是内源性杂质而非蛋白。
mhp77 回复于:2006/4/6 16:28:00
我也觉得不一定是蛋白的事。
lzgxgz 回复于:2006/4/7 9:03:00
用的什么检测器?看看杂质光谱图先确定是什么物质吧
mhsr 回复于:2006/4/4 9:22:00
离心机的转数高一些试试,14000rpm怎么样
 回复  1# guanzm1997  回复于:2006/3/31 23:15:00
可以用乙腈沉淀蛋白。可以用1:2的比例,当然乙腈越多越好,沉淀的会越完全。其实最好液液萃取,但你的成分是水溶性的。所以沉淀蛋白吧。
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