回复xiaoxin2809发表于:2020/9/21 16:38:22悬赏金额:
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未解决
思考了半天要把这个帖子发到哪里,确实有凝胶色谱的版块,却是GPC的,我要做的GFC也只是把凝胶柱装到普通液相上,而且这里专家也多,应该更能帮我解决问题,所以发到这里了。
言归正传,我是一个凝胶色谱的新手,之前只用葡聚糖凝胶做过分离,还是自己装的柱子,这次要做一种药的含量测定,美国药典已有方法,用了PolySep-GFC-P3000的柱子,打听了一下要8000多,有点贵,想找找有没有类似的柱子可能会便宜点,虽然有一点现成的资料,但我也要知道原理才行啊!这样问题就出来了,刚刚在网上找了半天,发现对于凝胶色谱的资料很少,而且大部分还是GPC的,图书馆也去了,没有收获。以下是我的问题:
1.用凝胶色谱测定分子量和质量分布的原理是什么呢?我知道凝胶色谱的分子排阻原理,这和测分子量有什么关系呢?色谱图的横坐标是时间吗?还是别的单位?
2.我要做的物质是含量测定,这是一种多取代混合物,其主成分的分子量范围是1000多到2000多(就是我要测含量的部分),当然也有一些小分子量的杂质,大部分不超过1000,那我在选择柱子(主要是排阻限)时有没有什么原则或依据呢?(虽然美国药典有明确的方法和柱子,我还是想知道)
3 对于GFC的凝胶应该也有好多种,他们之间只是在分离中分子量的差别吗?性质上有没有差别?拿我的情况为例吧,我要对一水溶性药物做含量测定,在选择柱子时只需考虑两点:1 用于水溶性的凝胶 2 选择合适的能分离的分子量。这就够了,也就是说如果有两种不同的凝胶,只要能满足上述两点,那我用哪种都能达到实验目的,这样理解对吗?
先谢谢给位老师朋友不吝赐教!