一般我们半年都会对一些分析仪器做内部校验的，就是确认分析仪器的性能，保证其检测结果的准确性，这几天我在做Waters e2695 2489 HPLC的内部校验，其流速线性就是做不好啊，求助……
      流速线性  校验方法为：用0.01mg/ml的尿嘧啶在流速为0.5 ml/min，0.75 ml/min，1.0 ml/min，1.5 ml/min，2.0 ml/min下各分别进样三针。以流速和尿嘧啶保留时间的倒数为纵坐标作图。测定流速线性。  时间 3.0min，流动相：A70%水：C30%甲醇，柱温35℃，进样量20ul，波长254nm。色谱柱：waters Xbridge C18 3.5um 4.6*50mm column
        要求：  以流速对保留时间的倒数作图，得线性关系y=ax+b，R＞0.99  b*1000/a的绝对值应≤100.0ul
      自己做的：其中线性0.5ml/min到1.5ml/min上是很好的，但是到了2.0这个流速就明显不行了，尿嘧啶保留时间延迟了0.04min（应该在0.32，结果做了很多遍都在0.36），这个是可以肯定的，小弟就不发数据了，初步分析：1，在色谱柱的另一端，用10ml容量瓶，秒表测流速，很不可思议，5分钟，刚好10ml。流速没有问题？2，更换色谱柱，更换新甲醇及纯化水，结果还是这么多3，在泵那里，没有发现漏液啊……
        各位高手，帮忙指点一下~~~·谢谢