怀疑样品没有被冲出柱子，要不然就是检测波长设置的问题
可以将柱子倒过来，用小流速，0.2左右，长时间冲洗，用梯度洗脱，此外最好不要全部用纯水或是纯的有机溶剂，一般最少要有2%的水相，另外也有可能是你的梯度洗脱没有设置好，梯度洗脱的设置是很有要求的，不是随便设个百分之几十到百分之几十的这样，此外每个梯度洗脱多有，换梯度的时间是多久都不是随意的，这很有可能是你的样品不出峰的原因，梯度洗脱的设置，还是要先看文献，类似的样品，把别人已经设置好的梯度拿来用，再根据自己的具体情况稍加改动