1　主题内容与适用范围

本标准规定了用气相色谱法测定大米中杀虫双和沙蚕毒素的含量。
本标准适用于大米中杀虫双、沙蚕毒素的残留量测定。
本方法最低检出限为0.1ng。

2　原理

大米样品经0.1mol/LmL盐酸提取后，在咸性溶液中，转化成沙蚕毒素，以三氯甲烷提取后，蒸除三氯甲烷，用甲醇定容至1mL，以FPD-GC测定。

3　试剂

3.1　0.1mol/L盐酸。
3.2　0.1mol/L氢氧化钠。
3.3　0.1mol/L硫化钠水溶液。
3.4　甲醇:分析纯，重蒸。
3.5　三氯甲烷:分析纯，重蒸加无水乙醇，使含1%乙醇。
3.6　无水乙醇:分析纯。
3.7　无水硫酸钠。
3.8　杀虫双标准溶液:精确称取杀虫双23.8mg，以甲醇溶解，稀释至100mL，每毫升中杀虫双含量相当于沙蚕毒素100μg。根据需要，吸取一定量上述标准溶液，以甲醇稀释至一定体积，配制成应用液。
杀虫双转化:相当于沙蚕毒素4μg的杀虫双，按下述条件转化，最终浓度为每毫升含2μg沙蚕毒素。
3.9　沙蚕毒素标准溶液:精确称取沙蚕毒素草酸盐16.00mg，以甲醇溶解，稀释至100mL，每毫升含沙蚕毒素100μg，根据需要，吸取一定量上述标准溶液，以甲醇稀释至一定体积，配制成应用液。

4　仪器

4.1　台式离心机。
4.2　旋转蒸发器。
4.3　玻璃蒸馏器。
4.4　氮气蒸发器。
4.5　气相色谱仪(具火焰光度检测器，FPD)。
4.6　微量注射器。
4.7　一般玻璃仪器(略)。

5　分析步骤

5.1 样品处理:称取大米样品5g，加10mL0.1mol/L盐酸溶液，在振荡器上振荡30min，于1600r/min离心10min，将上清液倒于带盖量筒中，再以10mL0.1mol/L盐酸洗涤样品，如此重复三次。合并盐酸提取液，调节pH8.5～9，加0.1mol/L硫化钠溶液2mL放置过夜， 加2倍样品液体积的三氯甲烷于分液漏斗中，剧烈振摇1min，静置分层。 将三氯甲烷层经无水硫酸钠滤于三角瓶中，在旋转蒸发器中45℃蒸除氯仿，至剩余少许时，立即取出，用甲醇定容至1mL，待测定。
5.2　气相色谱条件:
5.2.1　色谱柱:3mm(内径)×2m玻璃柱；
填装涂有1.5%OV-17ChromosorbW(80～100目)有担体。
5.2.2　温度
柱温:160℃；
汽化室温:200℃；
FPD检测器温:170℃。
5.2.3　气体速度
载气(氮气)流速:70mL/min；
氢气流速:150mL/min；
空气流速:50mL/min。
5.2.4　其他条件
仪器灵敏度:×102；
衰减:×32；
纸速:0.5cm/min。
5.3　测定:
按上述色谱条件调试仪器，待仪器稳定后，用微量注射器注入样品或标准液，以保留时间为定性指标。
取杀虫双转化后相当于0.5、1、2、3、4、5ng的沙蚕毒素，注入色谱仪中，测量峰高。以杀虫双含量为横坐标，峰高为纵坐标，在双对数坐标纸上绘制工作曲线，根据样品的峰高定量。

6　计算

B·V×2.38
X=--------------------------
A·m

式中:X——样品中杀虫双含量，mg/kg；
B——测得样品的峰高(或面积)值，查标准曲线后得的沙蚕毒素量，ng；
V——定容体积，mL；
A——进样量，μL；
m——样品质量，g。

杀虫双分子量为355，沙蚕毒素分子量为149，将测得的沙蚕毒素量乘以2.38，即为杀虫双含量。

7　精密度

大米样品添加回收实验结果的变异系数小于20%。

8　其他

大米中沙蚕毒素及标准沙蚕毒素色谱图