1 主题内容与适用范围
本标准规定了用
气相色谱法测定大米中杀虫双和沙蚕毒素的含量。
本标准适用于大米中杀虫双、沙蚕毒素的残留量测定。
本方法最低检出限为0.1ng。
2 原理
大米样品经0.1mol/LmL盐酸提取后,在咸性溶液中,转化成沙蚕毒素,以三氯甲烷提取后,蒸除三氯甲烷,用甲醇定容至1mL,以FPD-GC测定。
3 试剂
3.1 0.1mol/L盐酸。
3.2 0.1mol/L氢氧化钠。
3.3 0.1mol/L硫化钠水溶液。
3.4 甲醇:分析纯,重蒸。
3.5 三氯甲烷:分析纯,重蒸加无水乙醇,使含1%乙醇。
3.6 无水乙醇:分析纯。
3.7 无水硫酸钠。
3.8 杀虫双标准溶液:精确称取杀虫双23.8mg,以甲醇溶解,稀释至100mL,每毫升中杀虫双含量相当于沙蚕毒素100μg。根据需要,吸取一定量上述标准溶液,以甲醇稀释至一定体积,配制成应用液。
杀虫双转化:相当于沙蚕毒素4μg的杀虫双,按下述条件转化,最终浓度为每毫升含2μg沙蚕毒素。
3.9 沙蚕毒素标准溶液:精确称取沙蚕毒素草酸盐16.00mg,以甲醇溶解,稀释至100mL,每毫升含沙蚕毒素100μg,根据需要,吸取一定量上述标准溶液,以甲醇稀释至一定体积,配制成应用液。
4 仪器
4.1 台式离心机。
4.2 旋转蒸发器。
4.3 玻璃蒸馏器。
4.4 氮气蒸发器。
4.5
气相色谱仪(具火焰光度检测器,FPD)。
4.6 微量注射器。
4.7 一般玻璃仪器(略)。
5 分析步骤
5.1 样品处理:称取大米样品5g,加10mL0.1mol/L盐酸溶液,在振荡器上振荡30min,于1600r/min离心10min,将上清液倒于带盖量筒中,再以10mL0.1mol/L盐酸洗涤样品,如此重复三次。合并盐酸提取液,调节pH8.5~9,加0.1mol/L硫化钠溶液2mL放置过夜, 加2倍样品液体积的三氯甲烷于分液漏斗中,剧烈振摇1min,静置分层。 将三氯甲烷层经无水硫酸钠滤于三角瓶中,在旋转蒸发器中45℃蒸除氯仿,至剩余少许时,立即取出,用甲醇定容至1mL,待测定。
5.2
气相色谱条件:
5.2.1 色谱柱:3mm(内径)×2m玻璃柱;
填装涂有1.5%OV-17ChromosorbW(80~100目)有担体。
5.2.2 温度
柱温:160℃;
汽化室温:200℃;
FPD检测器温:170℃。
5.2.3 气体速度
载气(氮气)流速:70mL/min;
氢气流速:150mL/min;
空气流速:50mL/min。
5.2.4 其他条件
仪器灵敏度:×102;
衰减:×32;
纸速:0.5cm/min。
5.3 测定:
按上述色谱条件调试仪器,待仪器稳定后,用微量注射器注入样品或标准液,以保留时间为定性指标。
取杀虫双转化后相当于0.5、1、2、3、4、5ng的沙蚕毒素,注入色谱仪中,测量峰高。以杀虫双含量为横坐标,峰高为纵坐标,在双对数坐标纸上绘制工作曲线,根据样品的峰高定量。
6 计算
B·V×2.38
X=--------------------------
A·m
式中:X——样品中杀虫双含量,mg/kg;
B——测得样品的峰高(或面积)值,查标准曲线后得的沙蚕毒素量,ng;
V——定容体积,mL;
A——进样量,μL;
m——样品质量,g。
杀虫双分子量为355,沙蚕毒素分子量为149,将测得的沙蚕毒素量乘以2.38,即为杀虫双含量。
7 精密度
大米样品添加回收实验结果的变异系数小于20%。
8 其他
大米中沙蚕毒素及标准沙蚕毒素色谱图