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共有 10 人回复了该问答[江湖急救令]:关于液相色谱的问题
 回复mai1985发表于:2011/5/14 13:33:25悬赏金额:20积分 状态:已解决
嗯嗯。。。(清嗓中。。。)
来令生,杰特们,高手们,大家好:
      我是刚学液相色谱的新菜鸟,在学习过程中遇到了种种我无法忍受,快要抓狂的问题,通过摆渡很偶然的来到了高手如林的风水宝地--仪器网,依稀间,我仿佛看到了无尽的黑暗中,一轮冉冉初升的太阳。。。(以下5928个字因为太过肉麻,己被管理员删除)
      在此道一声万福了,如果有能解决问题的方法,在下不胜感激。。。
问题一:

如图所见,在2。5min的时候出现了一个倒峰,(不好意思,图谱我调不出来,用WORD等工具都不行,也复制不下来,一怒之下就用手机拍下来了,不太清晰,见谅啊)我以为是流动相或者样品里面有杂质,于是换,连换了三次,包括进样器都用甲醇清洗了好几遍,也还是不行,顽固不化的倒峰还是在2。5min的时候准时到来,顺便说一下我的情况:岛津高效液相SPD-20A,流动相0。3%硫酸钠,样品H-酸单钠盐。基本情况就这样了,求各位高手帮帮忙。

问题二:
        基线不稳:不是向下飘就是向上飘,我说你要飘也往一个方向飘啊,五分钟前向下飘,五分钟后就向上飘了,开机都一二小时了,什么时候稳定下来呢?

问题三:
      新柱子压力太高:我换了别的柱子,完全OK,一换新柱子压力就高,堵了?不可能吧,那可是新的,二千多块一根啊,我翻了翻以前的论坛,有同学说把柱子反冲一下,可是我不敢啊,又不是旧柱子,这能行吗?会不会冲坏啊,还有的说用什么冰醋酸什么什么的,我这里没有那材料啊,请问还有别的方法吗?
17284539 回复于:2011/6/7 16:34:16
样品用流动相溶解可减小或消除倒峰,那个峰实际上就是溶剂峰。
基线偏移的原因有很多如;1系统没有平衡好 2环境温度的变化 3检测器是用空气做参比强的空气对流也会引起基线的微小变动。4,流动相。

只是个人经验
huang136 回复于:2011/5/16 17:20:06
关于基线的问题:
1、你的流动相超声处理了没有?如没有,进行超声处理
2、将泵停掉,查看基线是否正常?如正常,说明是泵出现问题
3、检测波长是否设定在仪器检测极限值附近
4、检测池是否被污染
5、单向阀可能出现问题
暂时就能给你怎么多建议,希望能对你有帮助
关于柱子的问题我没接触到,不好给建议了
lilyliu 回复于:2011/5/16 15:46:24
问题一、这个倒峰应该是SPD-20A检测器灵敏度相关的,基本上不用考虑消除;
问题二、新柱子很有可能出现出现类似情况,考虑用低流速如0.2ml/min连续冲24h。
问题三、新柱子的压力多大,如果不进样超过12MP可以考虑用甲醇、乙腈低速(0.05ml/min)反冲,这个本人试过,不会对柱子造成损害。
flhszf 回复于:2011/5/14 22:02:06
问题一:色谱图中的倒峰且在3分钟以前一般为溶剂峰,如不影响结果就不用管它。上图疑似为甲醇峰,可以进一针甲醇看一看验证一下。
问题二:无法看到坐标单位,建议做个截屏看一下再判断。
问题三:请详细阅读色谱柱说明书,不同色谱柱在使用相同流动相的压力是不同的,有的会差别很大,看一看说明书中出场报告使用的流动相和压力于现在是否相符。
wyj2008a 回复于:2011/5/14 20:56:13
几点建议:
1、首先楼主可以用拷屏的办法来获取谱图,在显示屏上将谱图调至合适的尺寸,按[PRT SC],然后黏贴在word文档或画图板上保存即可。
2、从谱图上看,峰的分离情况不好,可以在分离条件上下些功夫调调,可能会更好。
3、楼主能否传个完整的谱图上来,大家也好帮你解决问题。
 回复  1# wyj2008a  回复于:2011/5/14 20:56:13
几点建议:
1、首先楼主可以用拷屏的办法来获取谱图,在显示屏上将谱图调至合适的尺寸,按[PRT SC],然后黏贴在word文档或画图板上保存即可。
2、从谱图上看,峰的分离情况不好,可以在分离条件上下些功夫调调,可能会更好。
3、楼主能否传个完整的谱图上来,大家也好帮你解决问题。
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