回复laina0319发表于：2011/4/21 22:32:16悬赏金额：
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各位大虾，我最近用完仪器（UPLC-MS/MS）冲洗色谱柱时，发现平衡时的柱压相对于以前高了不少，请问如何冲洗能恢复到之前的状态？我平时是用100%的甲醇冲洗，流速0.2ml/min，我用的是RP-18色谱柱。请指教！
你首先先检查一下看看到底是不是仪器有部分阻塞而导致的色谱柱压力升高。具体检查方法，撤掉色谱柱，将2根管路对接，然后用正常流速冲洗，如果压力过高，说明仪器发生堵塞。如果压力正常则说明柱子的问题。
如果确定色谱柱的问题，检查一下你是否使用了缓冲盐，如果使用了，建议用ACN/H2O=5/95或MeOH/H2O=10/90，将柱温提高至40-50℃，使用0.1ml/min或0.2ml/min的流速冲洗1小时以上，然后然后增大有机相的比例继续冲洗，最后再用纯甲醇冲洗。
也可采用反接的方式使用上面的方法进行清洗。
如果是新柱，不建议反接冲洗，如果用过缓冲盐，建议先用水：甲醇95:5或90:10冲洗，流速建议0.5ml/min，或者更低，冲洗40个柱体积左右，换纯甲醇或甲醇：水95:5再冲洗，看柱压是否下降
不过对UPLC柱子而言，因为内径很小，很容易污染导致柱压升高，因此要从源头抓起，也就是对样品处理要求很干净，对流动相要求也很高，最好是进口色谱纯试剂，使用前要用0.22的微孔滤膜再过滤
cgx1982105 回复于：2011/4/22 9:01:51
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