以前做的都是反相HPLC，第一次用强阳离子交换，POLYLC的SCX柱，5um粒径，硅胶基质，100*4.6的柱子，流动相为：A：5mM乙酸钠+20%ACN+5mM高氯酸钠，乙酸调pH=3.7，B相：5mM乙酸钠+20%ACN+200mM高氯酸钠，乙酸调pH=3.7，梯度为100%A--30min--100%B。样品为人工合成九肽，等电点范围在6~9，样品进样后1.4min就被冲出，怀疑是ACN或盐浓度过高造成，于是把A相设定成100%水，B相为5mM乙酸钠+20%ACN+5mM高氯酸钠，乙酸调pH=3.7，梯度不变，调整后仍然如此。把流动相两相都用氨水调至pH=7.0，依然如此；把A相再设定成100%水，B相为5mM乙酸钠+20%ACN+5mM高氯酸钠，氨水调pH=7.0还是如故。实在分析不出不知道是什么原因，请离子交换经验丰富的板油给予指点迷津，谢谢！