回复wmmsx发表于:2011/3/12 12:23:43悬赏金额:
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未解决
以前做的都是反相HPLC,第一次用强阳离子交换,POLYLC的SCX柱,5um粒径,硅胶基质,100*4.6的柱子,流动相为:A:5mM乙酸钠+20%ACN+5mM高氯酸钠,乙酸调pH=3.7,B相:5mM乙酸钠+20%ACN+200mM高氯酸钠,乙酸调pH=3.7,梯度为100%A--30min--100%B。样品为人工合成九肽,等电点范围在6~9,样品进样后1.4min就被冲出,怀疑是ACN或盐浓度过高造成,于是把A相设定成100%水,B相为5mM乙酸钠+20%ACN+5mM高氯酸钠,乙酸调pH=3.7,梯度不变,调整后仍然如此。把流动相两相都用氨水调至pH=7.0,依然如此;把A相再设定成100%水,B相为5mM乙酸钠+20%ACN+5mM高氯酸钠,氨水调pH=7.0还是如故。实在分析不出不知道是什么原因,请离子交换经验丰富的板油给予指点迷津,谢谢!