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共有 10 人回复了该问答柱后灌注法
 回复muulee发表于:2020/2/13 15:05:24悬赏金额:9积分 状态:未解决
        “柱后灌注法属于动态分析基质效应的方法,将针泵及液相色谱系统通过T型进样阀与质谱仪相连。将空白样品按待测样品的处理方法提取后,利用待测样品的洗脱条件通过HPLC进行色谱洗脱,同时用针泵将特定浓度的被测物以恒定速度注入,两种溶液一并通过T型进样阀进入质谱仪,进行待测物离子信号强度检测。被测物信号响应的变化将直接反应生物基质对于被测物的影响,同时信号强度随时间的变化关系也有助于色谱条件的优化。
柱后灌注法属于动态分析基质效应的方法,将针泵及液相色谱系统通过T型进样阀与质谱仪相连。将空白样品按待测样品的处理方法提取后,利用待测样品的洗脱条件通过HPLC进行色谱洗脱,同时用针泵将特定浓度的被测物以恒定速度注入,两种溶液一并通过T型进样阀进入质谱仪,进行待测物离子信号强度检测。被测物信号响应的变化将直接反应生物基质对于被测物的影响,同时信号强度随时间的变化关系也有助于色谱条件的优化。”
      没做过,不知道理解的对不对,请问该方法针泵将特定浓度的被测物以恒定速度注入的同时,在HPLC那面进样吗?我们使用的是waters的UPLC-Quattromicro这款仪器,也能进行此项操作吗?可以将结果采集吗,是不是只能在Tune界面上观察峰的强度变化?上文提到“利用待测样品的洗脱条件”应该用等度吧,用梯度的话在梯度变化过程中峰响应强度肯定有变化。“助于色谱条件的优化”应根据结果如何进行优化?柱后灌注法是不是只能确定在一定流动相条件下,在不同时间段是否有基质效应?请哪位做过的老师讲解一下!
 回复  1# capinter  回复于:2020-02-13 16:09:24
不是在HPLC那边进样的。
针泵连接在柱后离子源之前,也就是说在色谱柱的出口及离子源的进口加装一无死体积三通,针泵连接在三通上,同时将柱子出来的流动相及针泵打进的特定浓度的被测物推入质谱仪。
结果采集与你做的样品一样的,会有数据保存,其实意义相当于加标吧。
洗脱条件不限于等度吧,看你的方法。
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