流动相:50%甲醇
样品:甲醇溶解
色谱柱:XB-C18(品牌:列序)
柱温:35摄氏度
流速:0.8ml-min 进样量:10ul
检测器:RI-UV 仪器型号:Ultimate3000(DIONEX 戴安) 示差检测器型号(RI-101 SHODEX )
色谱图如下:
![](http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011191719_260736_1608710_3.jpg)
在第一张图中---也即RI图谱,第一个倒峰应该是溶剂峰,那么第二个倒峰怎么解释呢?是不是我的样品还不纯呢?
对应的峰在紫外图谱中几乎没有吸收,而且相应峰的时间也没用对上。如果说是时间延迟,那么第一个倒峰和第二个倒峰、以及第三个色谱峰的时间应该一一对应----都会相应延迟。
但是,在RI图谱中,第一个倒峰的时间是4.2min,第二个倒峰的时间是7.58min,第三个峰的时间是11.7min;而在紫外图谱中,第一个倒峰的时间是3.9min,第二个倒峰的时间是8.0min,第三个峰的时间是11.65min------第二个倒峰的出峰时间没有相应对上,
这个第二个倒峰我无法解释。
另外说明一下:这个样品是我制备接下来的一个峰-----也即上图对应的11.7min出的峰,制备前我用ELSD-DAD分析过(菲罗门的色谱柱,50%甲醇),这个11.7min处的峰很正态;紫外上能看到这个峰的前面10.7min处有一个极其微弱的峰,ELSD几乎没有响应。但是呢做制备的时候(用的是菲罗门的制备柱),这个11.7min处的峰放大后前沿有一点鼓(询问之后应该是柱子的问题)。
还有,开始的时候,我是将11.7min处的峰整个都接下来;后来为了避免接峰不纯,我将这个峰前面接一半,后面接一半。 但是发现,将
整个峰接下来的样品与将只接后面一半的样品进样分析后,二者色谱图完全一样(也即上面的图谱)。 且样品以TLC检测-----都只有一个点(两种通用型显色剂)
重申我的问题:怎么解释第二个倒峰? 我的样品是否已经纯了?