回复hxjiang发表于：2005/10/13 16:28:00悬赏金额：
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请教一下，最近做的HPLC，为反向柱，紫外检测谱存在这样一个现象，同一个样品有时测出结果是：保留时间0-5 无吸收，5-15有两个尖锐的吸收峰，20-25一个吸收峰；
但有时结果变成：保留时间0-5 强吸收，5-15无吸收峰，20-25一个吸收峰不变；
这是怎么一回事？是仪器原因，还是我的样品自身存在变化呢？
忘高手多多指点！！！！
wyy_56 回复于：2005/10/24 20:02:00是不是条件不能保证恒定呢？可能和溶剂有关，走一针溶剂看看应该
问题好象很多哦！
首先你的梯度洗脱在起始和结束都未给足平衡时间。即在同一个浓度水平上应该让它走3分钟以上。如果其它条件全都排除了则可能是此问题，也就是两个进样之间未平衡好柱子。你可以用标准品确定目标物峰是哪个RT，看它是否飘移。
此外，检测池中有污染，或者自动进样器的洗针液不对，或者自动进样品中的垫片已老化松驰，有污染，或者柱子使用前一直含一些盐的颗粒未洗干净须好好冲洗并平衡好再使用，或者你配的流动相水质或有机溶剂中杂质干扰等等都有可能。
也许还有其它原因。
好好检查一下就会好的。
你的样品用什么溶解的啊，有可能溶剂对他有干扰，你最好先扫一下溶剂
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