原文由 lzhwin(lzhwin) 发表:
想做植物鞘脂定量。有一篇发在RCM上的文章，利用LC/MS/MS分离定量了168种鞘脂（sphingolipid）。但是文献上有好几个地方看不明白。

1、如果想定量一种确定的鞘脂一定要有标样吗？昨天去请教老师的时候她告诉我一定要有纯的标样，但是文献中似乎不是这样做的，它仅仅只选了一个内标（植物里不存在的），然后就做出了各种鞘脂（包括内标本身）的标准曲线。168种啊，光买标准品也买不起啊，何况很多根本就没有。

内标可以只有一个，但是如果你要定量所有的鞘脂，就需要所有响应的标准品。

2、根据管理老师的说法我需要准备纯的样品来建立MRM方法学，文献上是这样说的：use purified sphingolipids frome plant for MRM......但是文章本身并没有说怎么得到purified sphingolipids，我认为是文章的作者自己制备的，管理的老师认为是买的。但是文章里之后制备粗提物（上样检测）的方法。请大家说说自己的看法。
自己制备也可以，但有一点，你必须保证制备的纯度，或者说你要知道制备样品里面含有多少。只有这样才能用于定量。

3、文章里制备样品时全部用的玻璃制品（因为是脂类），研磨时则利用匀浆器加玻璃匀浆锤实现的，此步可否直接使用液氮+研钵来实现（那个匀浆器和匀浆锤太贵了而且就为这一个实验）。


4、制备的最后一个过程文献里这样写：...dried under nitrogen，此步怎么实现？
这一步就是利用氮吹仪吹干。

谢谢大家了！