大家好，我现在正在做孔雀石绿HPLC检测的方法测定，开始用的是FDA 的方法，但是回收率比较低，在60%左右，我想提高一下，自己也试过改变那几种提取试剂的量，不过效果不是很好，请大家帮我看看，能不能给些建议，特别是那几种试剂决定了回收率。
以下是我的提取步骤：
样品5g
+ 5ml 醋酸胺缓冲液 + 2ml 0.25g/ml盐酸羟胺溶液 + 2 ml p-TSA
震荡
+25ml乙腈
震荡
+10 硅藻土
震荡 离心 上清液加入分液漏斗（内有50ml 水+2ml 二甘醇）
重复乙腈的提取，合并离心上清液
+25ml 二氯甲烷， 震荡，静止分层，取下层液
重复二氯甲烷提取， 合并下层液
旋转蒸发二氯甲烷层近干，用3ml 乙腈溶解，过离子交换柱，用5ml乙腈洗两次都加入离子交换柱，用 醋酸胺缓冲液 ：乙腈=1：1洗脱柱子
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