回复yuegy发表于:2009/8/11 23:05:05悬赏金额:
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已解决
我最近正在运用反相法测氟苯尼考(FF)和氟苯尼考胺(FFA)的含量。我的色谱条件如下:
流动相:磷酸二氢钠溶液(含NaH2PO4*2H2O 0.01mol/l, SDS 0.001mol/l,三乙胺 0.10%):乙腈=75:25,ph值调至3.5。
温度:30 流速:0.6ml/min。
样品:标准品(含5ug/ml的氟苯尼考和氟苯尼考胺溶液)、空白样品。【注:标准品是用定容溶液溶解,而不是流动相或双蒸水】
定溶溶液配制:0.01mol/l的磷酸氢二钠溶液,用磷酸调ph至2.8,经抽虑后与乙腈混合(比例为3:2)。
检测时发现的问题(如图可以看出):
(1)空白样品中有一杂峰与FF的出峰时间差不多,且峰面积大。
(2)分析5ug/ml的标准样品时,发现干扰FF的那个杂峰比起测空白样品时峰面积小了很多。
(3)同一条件,测量同一样品(5ug/ml),发现FFA的保留值不断增加,而FF的保留值没有多大的变化。
小弟是新手,请高手解释一下原因!!!!【注:图中4-kb表示空白样品,4-5表示5ug/ml的样品,前面的是FF的药峰(12.542、12.748),干扰峰(13.197、13.163、13.103、13.108)后面的是FFA药峰(16.516、18.768)
1.我没看见你的谱图
2.谱图中的杂峰大小变化没有必要去考虑的,如果它真的干扰你的目标峰,再小你也得把它分开,你要是实在是太在意这个,那我建议你标品,空白和样品的溶剂都统一,这样可能会好些
3.从你给出的数据中看得出,你柱子的平衡时间不够,多走些时间,还有你的流动相不要开始就混合,可以试着改变比例,来排除那个杂峰的干扰
nnsss 回复于:2009/8/12 9:52:27
总体看是条件不成熟,保留时间漂移,还有分离度不够,呵呵