回复dong3626发表于：2009/7/22 21:16:03悬赏金额：
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最近，在做一个工艺实验：主要是利用鲜叶中的多酚氧化酶酶促氧化生产茶色素。
中间需要在线取样分析含量变化。
但是因为溶液里面残存有酶液，如果不将酶失活或者处理的话，反应还会继续，那如何终止酶反应呢？
目前我们的做法是：
1. 取出后，用普通滤纸过滤，放置零下20度冰箱中保存，直至开始分析。
2. 取出，加入有机溶剂，如乙醇或者乙腈，将反应终止，分析！
有个小问题：在1中，用滤纸过滤，感觉酶一般比较大，可以被截留？不知道是不是这样呢？
大家还有什么好 的办法没有？？
原文由 dong3626 发表:
茶叶里面的酶主要就是多酚氧化酶。。。
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茶叶里可能你需要研究的是多酚氧化酶，其实里面有很多很多的酶的。
如果有机试剂消耗量比较大的话，你可以添加高浓度的盐。例如盐酸胍，可能比有机试剂要便宜一些。
原文由 dong3626 发表:
最近，在做一个工艺实验：主要是利用鲜叶中的多酚氧化酶酶促氧化生产茶色素。
中间需要在线取样分析含量变化。
但是因为溶液里面残存有酶液，如果不将酶失活或者处理的话，反应还会继续，那如何终止酶反应呢？
目前我们的做法是：
1. 取出后，用普通滤纸过滤，放置零下20度冰箱中保存，直至开始分析。
2. 取出，加入有机溶剂，如乙醇或者乙腈，将反应终止，分析！
有个小问题：在1中，用滤纸过滤，感觉酶一般比较大，可以被截留？不知道是不是这样呢？
大家还有什么好 的办法没有？？ |
普通滤纸过滤应该是无法达到过滤酶的作用，用普通滤纸过滤的作用可能是去除不溶物，至于放置于-20冰箱中，使酶的活性降低，反应暂时停止，之后可直接进行分析，这种做法一般用于检测酶反应的过程。
采用有机溶剂能起到使酶失活的作用，比较适合于后期采用反相检测的情况。
mcds 回复于：2009/7/23 16:13:52
个人觉得滤纸只能滤掉大的酶基质的颗粒，酶是应该具有溶解性的，滤不掉。低温只是能大大降低酶活性，尽可能使之处于停滞状态吧。
酶也是蛋白质，一般都是加热，重金属，盐析的方法使它变性吧，不过对于特定的酶可能要用有针对性的方法的。
酶应该留在滤纸之上的吧～我以前用过好象是在上面的～不知道其他的酶怎样
原文由 dong3626 发表:
2. 取出，加入有机溶剂，如乙醇或者乙腈，将反应终止，分析！ |
这个方法可靠些。
hmzhou83 回复于：2009/7/24 15:16:04
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