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共有 12 人回复了该问答流动相用磷酸盐缓冲液后用水冲柱子,柱效大大降低,怎么办?
 回复zetala发表于:2009/6/9 15:23:57悬赏金额:50积分 状态:已解决
岛津VP-ODS2色谱柱,流动相为甲醇:KH2PO4缓冲液(5:95),之后,用水冲柱30min,流速为0.4-0.8mL/min,再用甲醇冲了1h。第二天以甲醇:KH2PO4缓冲液(30:70)为流动相,色谱峰面积变很小甚至不出峰。而且无论用不同的流动相还是甲醇,柱压都较以前同条件下有较大降低。
    是不是用水冲时间过长,造成部分柱填料塌陷了?有没有什么补救措施,能使柱效提高?希望各位高手给予帮助!急!!!(柱子刚买还没用多长时间呢,买时花了4000-5000块,如果就这样报废,太可惜了)
emoc98311 回复于:2009/6/9 16:29:26
你照我说的用纯甲醇冲洗后试下吧,应该可以的
judy_1220 回复于:2009/6/9 16:11:29
原文由 zetala 发表:
说明书上说如果流动相有有机盐的话,先用水以1mL/min速度冲10min,再用甲醇冲;如果流动相如果有离子对溶剂或溶于水的物质的话,用甲醇或乙腈(含0.1%乙酸)冲。
    我不清楚我实验的流动相是属于哪种情况,如果是第一种情况,那么,我用水冲时间太长了,如果是第二种情况,那就更糟了。


ODS2的柱子没那么娇气,不出峰你还是找找其它原因,
wsy18 回复于:2009/6/9 15:51:33
看看柱子的说明书有什么规定。
一般柱子不能用纯水冲洗,应该用5:95的甲醇:水溶液冲洗,最后过渡到纯甲醇。
03yx2 回复于:2009/6/9 19:38:02
原文由 zetala 发表:
我现在用甲醇:水(70:30)冲呢,冲了2h,柱压有所上升。
我决定用甲醇:水(70:30)再冲一段时间,然后换纯甲醇冲,从小流速逐渐过渡到大流速,再降到小流速,冲一晚上,明天再看看情况。(谢谢各位了,明天我再分配奖励分吧)


冲洗条件并没很大问题啊。首先看看你的柱子可以用纯水吗?
新买的柱子没有那么快就坏了,冲洗时间长点先看看,坏了可以联系厂家商量。
也可以换另一台仪器来冲洗,看看压力,排除仪器问题。
 回复  1# emoc98311  回复于:2009/6/9 15:30:12
水冲时间过长,流速过大,造成部分柱填料塌陷可能性比较大
你用纯甲醇从低流速一直到高流速冲洗活化一个晚上看会怎么样?
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