回复dickwang2008发表于:2009/5/31 16:07:34悬赏金额:
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我们在进行生物样品分析时,需要建立生物样品分析的标准曲线。我知道的方法有两种:一种是化合物的储备液用有机溶剂,如甲醇、乙腈来稀释得到工作溶液,然后按照方法将一定量的工作溶液加入到生物基质如血浆中,进行处理后进样分析;另外一种方法是化合物的储备液用合适的溶剂来溶解,然后一直使用生物基质来稀释,然后按照样品处理方法来处理。
从事生物样品分析的站友,你们是如何配制生物标准曲线的?上面两种做法你倾向于哪一种?为什么?
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ya 回复于:2009/5/31 17:22:58我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线,然后按照一定比例加到介质中去,加进去的有机溶剂比例在2%内!
我是用后者,配制一定浓度的化合物的储备液(一般用甲醇定容),然后用生物基质来一步步稀释,配成几个点的标准溶液,然后按照样品处理方法来处理,进样。这样做线性确实不好把握,但每一步都精准处理的话达到两个9还是没问题的(液质联用)。
至于第一中,只能在线性一直不好的时候配一条溶剂溶解的曲线找问题,真正意义不大。
这两种做标准曲线的方法我都没有用过,如果将标准溶液添加到样品中作前处理,这不就是所谓的工作曲线么,如果使用基质加标做曲线,一个点所加的应该也是一样的,不然就没法衡量和比较了。
如果说是要接近真正的样品,那么储备液和工作液最好都是水溶的,毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题,很少使用纯水溶解的。
我一般用第一种方式做标准曲线。
原因大概是:1 用第二种,标曲各个点的有机溶剂含量不同,这样基质就不同,用质谱测定,高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的,所以一般也不考虑。