回复dickwang2008发表于：2009/5/31 16:07:34悬赏金额：
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我们在进行生物样品分析时，需要建立生物样品分析的标准曲线。我知道的方法有两种：一种是化合物的储备液用有机溶剂，如甲醇、乙腈来稀释得到工作溶液，然后按照方法将一定量的工作溶液加入到生物基质如血浆中，进行处理后进样分析；另外一种方法是化合物的储备液用合适的溶剂来溶解，然后一直使用生物基质来稀释，然后按照样品处理方法来处理。
从事生物样品分析的站友，你们是如何配制生物标准曲线的？上面两种做法你倾向于哪一种？为什么？
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ya 回复于：2009/5/31 17:22:58我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线，然后按照一定比例加到介质中去，加进去的有机溶剂比例在2%内！
我是用后者，配制一定浓度的化合物的储备液（一般用甲醇定容），然后用生物基质来一步步稀释，配成几个点的标准溶液，然后按照样品处理方法来处理，进样。这样做线性确实不好把握，但每一步都精准处理的话达到两个9还是没问题的（液质联用）。
至于第一中，只能在线性一直不好的时候配一条溶剂溶解的曲线找问题，真正意义不大。
这两种做标准曲线的方法我都没有用过，如果将标准溶液添加到样品中作前处理，这不就是所谓的工作曲线么，如果使用基质加标做曲线，一个点所加的应该也是一样的，不然就没法衡量和比较了。
如果说是要接近真正的样品，那么储备液和工作液最好都是水溶的，毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题，很少使用纯水溶解的。
我一般用第一种方式做标准曲线。
原因大概是：1 用第二种，标曲各个点的有机溶剂含量不同，这样基质就不同，用质谱测定，高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的，所以一般也不考虑。
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