回复hc1027发表于:2009/5/15 14:13:25悬赏金额:
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已解决
我是用UV-2550中的动力学模块测酶活。(锰过氧化物酶MnP酶活测定方法: 先将0.2113g MnSO4 溶解于1 L 酒石酸缓冲液( 50mmol·L - 1 ,pH = 4.5) 中,再取2.4 mL 的该溶液和0.6mL 粗酶液混匀,即得3 mL 反应液. 在30 ℃下,往此反应液中加80μL H2O2 溶液(20 mmol·L - 1 ) 启动酶促反应,并在290 nm 波长下测定反应2 min 前后的反应液吸光度变化. 一个酶活力单位(U) 定义为每分钟氧化Mn2 + 产生1μmol Mn3 + 所需的酶量.)发现有些酶液的颜色较深(非纯酶液,而是用锰过氧化物酶降解木质素后的发酵液 ,棕黄色,黄褐色那样),从而无法实现自动调零,作出来的曲线也是波动特别大,锯齿状,没法读数。请问各位有没有好的解决方法?仪器操作上的或者是酶液的预处理方面的都可以
谢谢了
tutm 回复于:2009/5/16 11:35:44你是使用290nm单色光测试样品,因此色度(可见光区域的吸收)不会有影响。
请你将参比先换成空白溶液,看反应液的起始吸光度是多少,如果大于1,请稀释至1以下。