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共有 71 人回复了该问答有关分光基线的问题
 回复hrcren发表于:2009/5/1 4:21:26悬赏金额:100积分 状态:已解决
前几天在做分光的时候,做了一个连续扫描,扫了几张图,一张空气的,一张蒸馏水的,一张水样的(见下图),我想知道,那些方形的锯齿状波形是怎样产生的?
首先声明,这是没有扣除空白,直接扫描的,扣除空白后再扫就是基本上是直线了。
咨询过工程师,按照工程师的说法,我的操作是错误的,做分光任何样品都要扣除基线空白的,就算是这样,我也想知道为什么会产生这样的方形波形。
在我的印象中,基线、噪音波动等等跑成200-400nm之间的那种形状我还可以接受,但跑成400nm以后的那种方形波我还是头一次看见,这波动也太大了吧,我总觉得总有什么地方不对头,我同一样品和不同样品均扫过不止一次,重复性相当好,都是这样的图形。
请资深的高手予以解答,这种波形是不是正常的,如果是,是什么原因造成的,如果不是,是什么部件出了问题。如蒙赐教,不甚感激
用的分光光度计是普析通用的“新世纪”


补充一些说明和图片:
我们有两台这一型号的分光,型号完全相同,连采购时间都是一起采购的。暂时分别命名为1#机和2#机。我在4月23号和4月24号分别做了十几张连续扫描图,现分别摘取部分图片如下:

(一)、1#机 23号的图片

PS:前面四张是基线校正前的,后面三张是基线校正后的。
PS PS:3楼的nemoium,在新世纪的软件界面上,有一个“基线”按钮,就是第一张图上我画了个蓝圈的那个钮,按一下就会扣除基线
PS PS PS:弱弱的问一下,PS在这里是什么意思,不要告诉我是PHOTOSHOP哦

1、水样


2、水样稀释


3、蒸馏水


4、重叠图


5、基线校正曲线


6、基线校正后水样


7、重叠图


(二)、1#机 24号的图片(前面三张是我第一次发贴时贴出来的三张图片)

1、空气


2、蒸馏水


3、样品水样


4、重叠图


(三)、2#机 24号的图片
应12楼auto1235的要求,做同一型号的另一台机子的对比试验,其实一开始我也怀疑是不是机子出了问题,就做了另一台机子的扫描,现在把做的图片传给大家看看:
PS:前六张是基线校正前的,后四张是基线校正后的。

1、空气


2、蒸馏水


3、水样


4、水样稀释3倍


5、水样稀释10倍


6、重叠图


7、基线校正曲线


8、基线校正后蒸馏水


9、基线校正后水样(稀释3倍)


10、重叠图


PS:最后一张图实际包含前面七张,为避免凌乱,只标识了最后三张。

再PS:我认为像上面2#机 24号的第八张图作为基线还可以接受,大家别看放得那么大,其实信号值不大,峰值才只有0.005Abs。而那个锯齿状的作为基线?本人认为难以接受,还有1#机 23号的基线也难以接受,虽然形状还算正常,但波动太大,峰值几乎达到2.0Abs,太大了,个人认为不太正常。
nemoium 回复于:2009/5/22 19:27:29
原文由 jelly98 发表:
这机器紫外能量较低,基线可见区的方波是切换放大倍数造成的。


看上去挺有道理的,要是能作个实验就好了。


tony81 回复于:2009/5/9 0:21:25
原文由 auto1235 发表:
新仪器一般不可能是灯有问题,
这台仪器比较有意思,可惜我没见过它的内部结构。

首先假定它是双光束双光电池或二极管阵列之类检测器的话:
1。 我希望能看到你扫描得到的样品光的能量图E1 和参比光的能量图E2, 如果这台仪器有这个功能的话。
2。 仪器的校正前的基线实际为E1和E2的比值透过率,然后再转化成A值的。
3。 如果能量图上也有这种有规律的锯齿状,我们再来看1#E1,1#E2,2#E1,2#E2四个能量图的特点,估计可以判断出是在检测器还是光路上的问题。
4。1#和2#机的锯齿状形状不一样,隐隐已经感觉这是仪器先天带来的问题。

继续探讨。另这台机器卖价在2W还是3W左右?


肯定是2光电池的结构
由于他的内部绝大部分是塑料的 如果遇到野蛮运输 估计够呛
这个型号的紫外的好像零售价在1w8左右
优点和缺点都集中在 塑料框架 波长电机细分驱动
auto1235 回复于:2009/5/16 0:50:46
原文由 hrcren 发表:
400nm以下的氘灯是开了的,只是刚启动时老是提示“氘灯能量低”,自检通不过,要把分光仪器开关好几次后,才能自检通过,不知道是不是这个原因
两张图都还在,有空的时候试着做一下计算,谢谢auto1235了


400以下能量低,就难怪200附近波动大了,
你想象0/0 是多少?
nkgzs 回复于:2009/5/15 10:04:00



我随便找了一张以前做的,你看看。
另再问楼主一下,图3是做了蒸馏水基线,重新扫描蒸馏水出的图,对吧?
jelly98 回复于:2009/5/22 9:02:03
穿心氘灯指氘灯发光处有一前后通孔,钨灯放在氘灯背后,钨灯的光通过氘灯上的通孔发射出来。
 回复  1# slake99  回复于:2009/5/1 7:38:39
仪器电压是否有问题,查查
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