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共有 20 人回复了该问答HPLC 方法摸索
 回复hupilan007发表于:2009/4/29 10:16:02悬赏金额:20积分 状态:已解决
HPLC_1200_B: 14-Apr-2009 461336 AND 461337
大家都知道HPLC方法说简单也简单,说难也难。就我所知的也不多,无外
色谱柱的选择,流动相的选择以及样品前处理方法的不同.柱子我一般用C18,C8 的,耐酸的一般 Agilent zorbax SB C18,而其余的只要满足PH 2-8就可以了。超出范围就不是柱子问题了,该考虑流动相换缓冲液了。其实我真的不知道各种不同型号的柱子有什么不同。粒 径 小的当然柱效高,分离效果好些,但是压力往往高,对色谱柱要求也比较高,也就是费柱子,而粒径大的自然分离效果差了。象是键合相,什么十八烷基,氨基等,用是用过,但也搞不懂有什么太大差异。反正HPLC方法色谱柱的选择我是知道的不多。
ycsun2003 回复于:2009/5/7 16:18:31
建立一个方法首先得知道你的药分析物质的理化性质,例如pKa值,极性大小,是否容易分解,溶解性,在紫外有无吸收等等。然后再研究用什么方法,正相还是反相,流动相pH,加不加离子对或者缓冲盐......啊呀,需要考虑的太多了,具体问题具体分析,给你一本书,研究去吧
实用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱法的建立[/url]
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fengxuemei 回复于:2009/5/7 10:43:31
还有本书: 实用高效液相色谱法的建立(第2版)
很经典的,资料中心有下载的,建议LZ好好看看,找不到也可以站内短信联系我~~~
 回复  1# hupilan007  回复于:2009/4/29 10:17:24
流动相无外乙腈,甲醇与水配了,大多数物质都可以用它们分析了,如果有解离再换缓冲液,或者加甲酸,三氟乙酸什么的 流动相的选择在我看来就是这么简单而已。样品前处理相对可能就复杂一些了。有盐析,醇析,过滤,离心等等,搞不好就会影响方法的可靠性,准确性。反正摸方法真的我是外行,不知怎么搞,向各位高手求助,希望大家不吝赐教!
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