回复macroweixin发表于:2009/4/21 17:58:16悬赏金额:
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已解决
我们用的是Waters的1525 凝胶渗透色谱,柱子是三根串联。也有用保护柱。
型号 Effective Molecular -weight Range Capability index
HR 2 500 to 20,000 Shipped in THF
HR 4 5,000 to 500,000 Shipped in THF
HR 5 50,000 to 4,000,000 Shipped in THF
但是我们用的是里氯仿作为流动相,现在柱子只用了18个月,柱子压力就飚高,现在是3000+psi,一开始只是是870psi左右,现在经检测,每一根柱子都有不同程度的堵塞,压力都是1000+左右,但是保护柱却没有压力。之前用的另外一套柱子也有相同的现象,我们的操作都是按照说明书进行的,从样品的过滤,到流动相的使用,是进口的HPLC的氯仿。
请大家讨论一下如果解决该问题。谢谢啦。
进口柱筛板取下来拿甲醇之类的有机溶剂超声干净就可以
原文由 macroweixin 发表:
原文由 zhchen1130 发表: 换根新柱子试试看,压力如果降下来的话就是柱子的问题了,你们的柱子用了18个月比我们的长多了,我们用了3个月就坏了一根,反冲、超声清洗筛板什么的都没有效果就报废了,我们用GPC做肝素钠的分子量,有时间交流一下啊,我还是新手呢 |
你们是用什么作为流动相呀,这个比较郁闷哦,看来柱子是个大问题 |
我们是用的2.84%硫酸钠缓冲盐做流动相,盐分比较多,而且GPC柱子又比较娇贵,一个不小心就报废了
将柱子反接,低流速冲冲,看压力能否下降。我经常这样冲,对降低压力有一定效果。
你做的样品流动相一定要用氯仿吗?,我看你的柱子适合用THF。不行更换流动相试试。
样品里面是不是杂质较多?还有每次处理好样品以后凝胶柱是否没有净化恢复?保养也是很重要的一个步骤
可能样品在氯仿的溶解度不高,能不能换个容积洗洗柱子!