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共有 3 人回复了该问答MnP酶活测定及计算方法求助
 回复hc1027发表于:2009/4/11 17:39:52悬赏金额:20积分 状态:已解决
我是做关于酶解木质素方面的。实验中要测定MnP(锰过氧化物酶)的酶活。
我是用紫外光度法中的动力学测MnP的酶活,
(测定方法: 先将0.2113g MnSO4 溶解于1 L 酒石酸缓冲液( 50mmol·L - 1 ,pH = 4.5) 中,再取2.4 mL 的该溶液和0.6mL 粗酶液混匀,即得3 mL 反应液. 在30 ℃下,往此反应液中加80μL H2O2 溶液(20 mmol·L - 1 ) 启动酶促反应,并在290 nm 波长下测定反应2 min 前后的反应液吸光度变化. 一个酶活力单位(U) 定义为每分钟氧化Mn2 + 产生1μmol Mn3 + 所需的酶量.)

问题是我得到了吸光度随时间(2min)的变化曲线后,如何对它进行处理?应该取那些数据进行计算?如何得到要求的酶活?能帮小弟找一些这方面的资料吗?不胜感激。
我无法上传变化曲线,所以大致手绘下:

hongyu8188 回复于:2009/4/13 16:03:04
可以用QCM试试,把木质素固定在镀金的石英传感片上,当发生水解反应时传感器的频率会逐渐升高。
dong3626 回复于:2009/4/11 18:15:29
感觉是缺少一个吸光值和浓度之间的关系式。
我记得以前做的时候有个关系式的。。。现在给忘了。。

你可以查找下这个测定的 具体方法。很多文献都是很简单的描述。
 回复  1# dong3626  回复于:2009/4/11 18:15:29
感觉是缺少一个吸光值和浓度之间的关系式。
我记得以前做的时候有个关系式的。。。现在给忘了。。

你可以查找下这个测定的 具体方法。很多文献都是很简单的描述。
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